[發(fā)明專(zhuān)利]一種快速檢測(cè)馴鹿源性鹿產(chǎn)品的PCR試劑盒及制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210108558.2
• 申請(qǐng)日: 2012-04-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102605095A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 邢秀梅;楊福合;査代明;榮敏;蘇偉林;吳瓊
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 邢秀梅
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 吉林長(zhǎng)春新紀(jì)元專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司 22100
• 代理人: 陳宏偉

1.?一種快速檢測(cè)馴鹿源性鹿產(chǎn)品的PCR試劑盒，其特征在于包括以下引物：

上游引物：5’-GGAGTAATCCAGGTCGGTTTCTATC-3’

下游引物：5’-TAGGGCGGGATATGTTTGTGTATC-3’。

2.權(quán)利要求1所述的快速檢測(cè)馴鹿源性鹿產(chǎn)品的PCR試劑盒，其特征在于包括DNA提取液、PCR反應(yīng)液和陰性標(biāo)準(zhǔn)品；

所述的DNA提取液：

（1）低鹽緩沖液（pH?7.6-7.8）：12-13份Tris堿（三羥甲基氨基甲烷），32-35份?Na₂EDTA（乙二胺四乙酸二鈉），7-8份MgCl₂，4-5份NaCl,余份為水；

（2）細(xì)胞裂解液：4-6份?SDS十二烷基硫酸鈉，4-6份Triton?X-100(聚乙二醇對(duì)異辛基苯基醚)，1000份低鹽緩沖液；

所述的PCR反應(yīng)液：

ddH2O?、10?×?PCR?Buffer?、dNTPs?、上游引物、下游引物、Taq酶；

具體引物序列為：

上游引物：5’-GGAGTAATCCAGGTCGGTTTCTATC-3’

下游引物：5’-TAGGGCGGGATATGTTTGTGTATC-3’

陰性標(biāo)準(zhǔn)品：為無(wú)菌雙蒸水。

3.?權(quán)利要求2所述的快速檢測(cè)馴鹿源性鹿產(chǎn)品的PCR試劑盒的制備方法，包括以下步驟：

1）DNA提取液

（1）低鹽緩沖液（pH?7.6-7.8）：12-13份Tris堿（三羥甲基氨基甲烷），32-35份?Na₂EDTA（乙二胺四乙酸二鈉），7-8份MgCl₂，4-5份NaCl,余份為水；

（2）細(xì)胞裂解液：4-6份?SDS十二烷基硫酸鈉，4-6份Triton?X-100(聚乙二醇對(duì)異辛基苯基醚)，1000份低鹽緩沖液；

2)PCR反應(yīng)液：

（1）引物設(shè)計(jì)：在馴鹿的線粒體16S?rRNA基因區(qū)域，設(shè)計(jì)一對(duì)特異性引物，包括一個(gè)上游引物和一個(gè)下游引物；序列如下：

上游引物：5’-GGAGTAATCCAGGTCGGTTTCTATC-3’

下游引物：5’-TAGGGCGGGATATGTTTGTGTATC-3’

（2）PCR反應(yīng)液：

ddH2O??9.3ul，10?×?PCR?Buffer??1.5ul，dNTPs(100?uM)??2.0ul，上游引物(20?uM)??0.5ul，下游引物?(20?uM)???0.5ul，Taq酶(5U/ul)???0.2ul；

（3）陰性標(biāo)準(zhǔn)品：為無(wú)菌雙蒸水。