[發(fā)明專利](1,3-二苯基-1氫-4-吡唑基)甲基苯甲酸系列化合物的制備及其在黑色素瘤治療中的應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210106074.4
• 申請(qǐng)日: 2012-04-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103373961A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱海亮;盧翔;邢曼;文晴;呂獻(xiàn)海
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D231/12
• 分類號(hào): C07D231/12;A61K31/415;A61P35/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及(1，3-二苯基-1氫-4-吡唑基)甲基苯甲酸系列化合物及其制備方法與抗腫瘤藥物。?

背景技術(shù)

隨著人類生活和環(huán)境的變化，惡性腫瘤已經(jīng)成為一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病。幾乎所有的腫瘤都與細(xì)胞的異常增殖有關(guān)。Ras/Raf/MEK/ERK級(jí)聯(lián)是調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖的重要信號(hào)通路，被細(xì)胞外的生長(zhǎng)因子、激素、細(xì)胞因子所激活，從而調(diào)控細(xì)胞的復(fù)制、生長(zhǎng)、抗凋亡和分化。如果這條通路突變或者被異常開(kāi)啟，細(xì)胞增殖就會(huì)失控，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。?

Ras/Raf/MEK/ERK級(jí)聯(lián)中，Raf是很多藥物的重要靶點(diǎn)，Raf的突變和異常表達(dá)多見(jiàn)于黑色素瘤、結(jié)腸癌、卵巢癌、甲狀腺癌。在哺乳動(dòng)物中，Raf蛋白有三個(gè)成員：A-Raf、B-Raf和C-Raf，其中B-Raf與腫瘤發(fā)生關(guān)系最為密切，有66％的黑色素瘤B-Raf都會(huì)發(fā)生突變。大多數(shù)的B-Raf突變都是V600E型突變，B-Raf的表達(dá)會(huì)提高500倍，導(dǎo)致細(xì)胞的異常增殖和癌變。索拉菲尼是一種靶向B-Raf的抗腫瘤藥物，但是在黑色素瘤的臨床治療效果不顯著。?

本文我們?cè)O(shè)計(jì)合成了(1，3-二苯基-1氫-4-吡唑基)甲基苯甲酸系列化合物，并對(duì)其B-Raf和黑色素瘤抑制活性進(jìn)行評(píng)價(jià)，吡唑環(huán)類化合物上的氮原子可以和B-Raf的活性位點(diǎn)有很好的氫鍵作用，而苯甲酸里的苯環(huán)結(jié)構(gòu)可以和活性位點(diǎn)有疏水作用，從而特異性抑制B-Raf的活性，達(dá)到治療黑色素瘤的臨床治療效果。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一類新型(1，3-二苯基-1氫-4-吡唑基)甲基苯甲酸系列化合物以及它們的制備方法與用途。?

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：?

1.一類(1，3-二苯基-1氫-4-吡唑基)甲基苯甲酸衍生物，其特征是它有如下通式：?

結(jié)構(gòu)式中R1為：4-氟、氯、甲基、甲氧基。?

R2為：4-氟、氯、氫、甲氧基。?

2.一種制備上述的(1，3-二苯基-1氫-4-吡唑基)甲基苯甲酸衍生物的方法，它由下列步驟組成：?

步驟1.將取代基苯乙酮(20mmol)、鹽酸苯肼(25mmol)、無(wú)水乙酸鈉(30mmol)分別溶于乙醇，磁力攪拌，50-60℃反應(yīng)3h(TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)行程度)。反應(yīng)完畢后將反應(yīng)液旋干，乙酸乙酯和水萃取2-3次，旋干有機(jī)層，得固體。?

步驟2.先將DMF(4ml)和POCl₃(5ml)混合冰浴30min，然后將步驟1所得固體溶于3ml?DMF滴加至上述混合液中，逐漸轉(zhuǎn)入常溫至70-80℃反應(yīng)5h，冷卻至常溫后，倒入冰水中，用50％NaOH調(diào)pH至7-8，抽濾并水洗3遍，烘干后得固體。?

步驟3.將步驟2所得產(chǎn)物(1mmol)溶于乙醇(20ml)，加入NaBH₄(2mmol)。待TLC檢測(cè)原料反應(yīng)完畢后旋干反應(yīng)液，乙酸乙酯和水萃取2-3次，無(wú)水Na₂SO₄干燥，旋干有機(jī)層即得到固體物。重結(jié)晶或過(guò)柱純化固體物可得到白色固體。?

步驟4.將不同取代基的苯甲酸溶于二氯亞砜，回流3h，旋干，溶于二氯甲烷。滴加至步驟3所得產(chǎn)物的二氯甲烷溶液中，加入碳酸鉀固體，室溫反應(yīng)TLC檢測(cè)反應(yīng)完畢，旋干后乙酸乙酯和水萃取，無(wú)水Na₂SO₄干燥，旋干有機(jī)層得到固體。甲醇重結(jié)晶得到白色固體1-15。?

本發(fā)明的(1，3-二苯基-1氫-4-吡唑基)甲基苯甲酸類化合物具有抑制鼠源黑色素瘤細(xì)胞A375增殖的作用。因此本發(fā)明的(1，3-二苯基-1氫-4-吡唑基)甲基苯甲酸類化合物可做潛在的抗腫瘤藥物。?

具體實(shí)施方式

實(shí)施例一：(3-(4-氟苯基)-1-苯基-1氫-4-吡唑基)甲基4-氟苯甲酸(化合物1)的?制備?