[發明專利]具有靶向抗血栓活性的RGDFYIGSR、制備和應用

無效

• 申請號: 201210105107.3
• 申請日: 2006-11-30
• 公開（公告）號: CN102702314A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 彭師奇;趙明;王超;趙婧華
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/06;C07K1/02;A61K38/08;A61P7/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本申請是2006年11月30日申請的申請號為200610144234.9，發明名稱為“具有靶向抗血栓活性的多肽、其制備方法和應用”的專利的分案申請。

技術領域

本發明涉及具有靶向抗血栓活性的多肽RGDFYIGSR。本發明還涉及它的制備方法以及它作為抗血栓劑的應用，屬于生物醫藥領域。

背景技術

細胞黏附在細胞黏附性疾病(癌轉移、血栓形成、化學致炎和骨質疏松)的發展過程中起關鍵作用。調節性糖蛋白例如昆布氨酸、纖維蛋白原、RGD肽、YIGSR和YIGSK等都可以參與細胞黏附過程。它們與整合素受體有很強的結合能力。例如在血小板聚集過程中，RGDF與活化的血小板表面受體GP?IIb/IIIa結合起至關重要的作用。RGDF與活化的血小板表面受體GP?IIb/IIIa的特異性結合，賦予了RGDF一種重要性質，即含RGDF可以向血小板活化的部位富集。在這樣一個前提下，把RGDF與抗細胞黏附的YIGSR綴合，便可以獲得靶向抗細胞黏附多肽。

發明內容

本發明的目的之一是對RGDF與YIGSR進行綴合，制備得到具有靶向抗血栓活性的多肽。

本發明的目的之二是提供一種制備抗血栓活性的RGDFYIGSR的方法。該方法包括：

1.采用液相合成方法，通過逐步接肽分別合成RGDF和YIGSR的保護中間體；

2.脫去RGDF保護中間體的C端保護基；

3.脫去YIGSR保護中間體的N端保護基；

4.把C端游離的RGDF保護中間體和N端游離的YIGSR保護中間體綴合，再脫去保護基得到RGDFYIGSR。

其中，所述的N端保護基是對多肽的N端進行保護時所常用的保護基團，例如可以是叔丁氧羰基(Boc)；所述的C端保護基是對多肽的C端進行保護時所常用的保護基團，例如可以是芐氧基(OBzl)，甲氧基(OMe)等。

以上所述的液相合成中間體并加以保護的方法是本領域的常規并公知的技術。

動物模型試驗證明，本發明的RGDFYIGSR具有較強的抗血栓活性。

為了進一步闡述本發明，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它們僅用來對本發明進行具體描述，不應當理解為對本發明的限制。

本發明中所出現的縮略語的說明：

THF????????????????????????四氫呋喃

DCC????????????????????????二環己基酰亞胺

DCU????????????????????????二環己基脲

OBzl???????????????????????芐氧基

Boc????????????????????????叔丁氧羰基

OMe????????????????????????甲氧基

HOBt???????????????????????N-羥基苯并三唑

NMM????????????????????????N-甲基嗎啉

具體實施方式

實施例1?HCl·Tyr-Ile-Gly-Ser(Bzl)-Arg(NO₂)-OMe的制備

1)Boc-Ser(Bzl)-Arg(NO₂)-OMe的制備

將0.59g(2.0mmol)Boc-Ser(Bzl)溶解在6ml無水THF中，0℃下加入0.27g(2.0mmol)N-羥基苯并三唑(HOBt)和0.45g(2.2mmol)二環己基羰二亞胺(DCC)。攪拌10分鐘后加入0.539g(2.0mmol)HCl·Arg(NO₂)-OMe的無水THF溶液。反應混合物用N-甲基嗎啉(NMM)調節pH?8-9，0℃攪拌24小時。停止反應，過濾除去沉淀出的二環己基脲(DCU)。濾液減壓濃縮，殘留物溶于乙酸乙酯中，得到的溶液依次用飽和NaHCO₃水溶液、5％KHSO₄水溶液和飽和NaCl水溶液洗。乙酸乙酯層用無水NaSO₄干燥3小時。濾除NaSO₄，濾液減壓濃縮除去乙酸乙酯。殘留物用柱層析分離(CHCl₃∶CH₃OH，30∶1)，得到0.969g(95％)目標化合物。ESI-MS(m/z)511[M+H]⁺。