[發(fā)明專利]千層塔石杉?jí)A甲的提取方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210100582.1
• 申請(qǐng)日: 2012-04-09
• 公開（公告）號(hào): CN102617469A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙勇彪;祝利;楊再江;向廷軍;何全慧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶市秀山紅星中藥材開發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C07D221/22
• 分類號(hào): C07D221/22
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生物堿的提取方法，特別是一種千層塔石杉?jí)A甲的提取方法。

背景技術(shù)

千層塔為石杉科石杉屬蕨類植物，又名蛇足石杉、救命王。主布東北、長(zhǎng)江流域和閩、粵、桂、滇、黔等省區(qū)。民間常將全草入藥，有毒，用于退熱、止血、消腫散毒、跌打損傷等。千層塔中含有的生物堿石杉?jí)A甲(HupA)是具有低毒、高效、可逆和高選擇性等優(yōu)點(diǎn)的乙酰膽堿酯酶抑制劑，對(duì)于治療重癥肌無力、中老年癡呆及提高記憶力具有良好的療效，并對(duì)抑制有機(jī)磷酸中毒有一定的作用。由于其獨(dú)特的藥用價(jià)值，千層塔及其提取物正日益受到國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)的廣泛重視。

目前，千層塔石杉?jí)A甲的提取方法很多，但均存在不同程度的缺點(diǎn)和不足。一般都市將千層塔粉碎后，加稀酸或有機(jī)溶劑浸泡萃取。如專利號(hào)200410052688.4“一種高純度石杉?jí)A甲的制備方法”，以及專利號(hào)200710018515.4“一種從千層塔中提取分離石杉?jí)A甲的方法”，只是簡(jiǎn)單的采用有機(jī)溶劑浸泡萃取，雖然純度很高，但收率很低，且生產(chǎn)量小，無法推廣；專利申請(qǐng)?zhí)?00910014866.7“一種從千層塔中提取分離高純度石杉?jí)A甲的新方法”，也只是簡(jiǎn)單的采用稀硫酸浸泡萃取，這些方法只能少量的使藏在細(xì)胞壁中的生物堿析出，回收率同樣很低，提取效率不高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種使原材料藥物中的石杉?jí)A甲充分析出，同時(shí)又能得到高純度石杉?jí)A甲的方法，為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是采用稀酸浸泡，結(jié)合超聲波輔助提取，稀酸稀堿萃取，活性炭除雜，低溫重結(jié)晶等工序提取石杉?jí)A甲，具體方法如下。

⑴粉碎：凈選千層塔藥材，粉碎，粒度為10-20目，過篩。

⑵提取：連續(xù)兩次提取，第一次提取是將千層塔粉粒用0.8%的鹽酸溶液按照固液比為1：20-25的標(biāo)準(zhǔn)浸泡60min，再用600W功率的超聲波提取15min，然后再浸泡60min，接著將提取液離心，取上清液；第二次提取是將濾渣用0.8%的鹽酸溶液按照固液比為1：18-22的標(biāo)準(zhǔn)浸泡45min，再用600W功率的超聲波提取10min，然后再浸泡45min，接著將提取液離心，取上清液，最后將兩次上清液合并。

⑶濃縮：用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將上清液濃縮至原材料重量的10倍體積。

⑷氯仿萃取：加10%的氨水調(diào)ph值為9-10，加入1/6體積的氯仿與濃縮液混合，萃取4次，合并氯仿相，再萃取一次。

⑸濃縮：用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，即得石杉總堿氯仿濃縮液。

⑹稀堿萃取：加入相同體積的1%NaHO溶液，混合，萃取6次，取下層。

⑺稀酸反萃取：加入相同體積的1%HCl溶液，混合，反萃取6次，至萃取顏色很淡為止，取酸水層。

⑻活性炭除雜：加入15倍0.8%的鹽酸溶液，調(diào)整pH值為1-2，加入相當(dāng)于濃縮液3%體積的活性炭，攪拌脫色4h，濾去活性炭，留取濾液。

⑼結(jié)晶：將濾液用濃氨水調(diào)至pH值為9-10。用等體積氯仿萃取1次，然后將氯仿層蒸干，得淡紅色固體；然后加入適量丙酮，加熱回流使之完全溶解，靜置冷卻，然后放入5℃冷藏室靜置24h，得微紅色固體。

⑽重結(jié)晶：再用少量氯仿溶解蒸干，用丙酮溶解低溫重結(jié)晶，得類白色固體；然后重復(fù)一次，得白色固體。

⑾干燥：將所得白色固體于烘箱中干燥5h，得純度大于99%的純品石杉?jí)A甲。

本發(fā)明的有益效果是稀酸浸泡，可將生物堿轉(zhuǎn)變?yōu)樯飰A鹽溶出，在提取過程中用超聲波輔助提取，可以使千層塔細(xì)胞壁破裂，從而更好地讓生物堿溶解在浸泡液中，提高回收率，經(jīng)檢驗(yàn)，采用這種方法提取石杉?jí)A甲，其回收率可達(dá)98.3%；采用稀酸和稀堿進(jìn)行萃取和反萃取，可以很好地去除雜質(zhì)，再用活性炭除雜，可以更好地除去雜質(zhì)，最后采用低溫重結(jié)晶反復(fù)除去殘留雜質(zhì)，可得到高純度石杉?jí)A甲。

附圖說明

圖1為本發(fā)明千層塔石杉?jí)A甲的提取方法流程示意圖。

圖2為本發(fā)明實(shí)施例1石杉?jí)A甲的高效液相色譜圖。

圖3為本發(fā)明實(shí)施例2石杉?jí)A甲的高效液相色譜圖。

圖4為本發(fā)明實(shí)施例3石杉?jí)A甲的高效液相色譜圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。

實(shí)施例1。