[發明專利]BRSK2SR2在制備抑制胰腺癌的藥物中的應用

無效

• 申請號: 201210100525.3
• 申請日: 2012-04-06
• 公開（公告）號: CN103361349A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 余龍;王穎黎;袁健
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/63;C12N15/10;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

技術領域

本發明屬于醫藥及基因工程領域，涉及一種抑制胰腺癌細胞生長的核酸分子，及其在制備胰腺癌藥物中的作用。

背景技術

胰腺癌是由胰腺癌上皮惡變形成的惡性腫瘤，雖然其發病率僅排名惡性腫瘤的第13位，但是其致死率卻在惡性腫瘤中位列第8位。根據世界衛生組織的統計，全世界每年有216?000多人確診為胰腺癌。在我國該癌癥發病率原很低，但近年也呈現逐年增多的趨勢，近年來已經升至第5位。即使現在有化療、放療、手術等多種治療方法，胰腺癌的生存率仍然不到5％。因為在出現初級癥狀時就已經伴有轉移現象，所以被確認為胰腺癌時往往已經是臨床晚期。因此只有10％的患者能夠接受手術，而輔助療法基本已經無能為力。造成胰腺癌的死亡率基本上與其發生率持平，五年生存率僅有5％。

胰腺癌的治療主要包括手術、放療、化療以及介入治療等。胰腺癌的治療強調綜合治療及多學科協作，對每一個病例需采取個體化處理的原則，根據不同患者的身體狀況、腫瘤部位、侵及范圍、有無黃疸、肝腎及心肺功能狀況，有計劃、合理的綜合應用現有的診療手段，以期取得治療效果的最佳化和對身體損傷的最小化。

胰腺癌早期缺乏明顯癥狀，大多數病例確診時已失去根治性手術的機會。外科治療需要針對不同病期和腫瘤病灶局部侵犯的程度，采取不同的手術方式。此外，胰腺癌還包括藥物治療、放射治療、生物治療和支持治療等。

迄今為止，外科手術仍然是最有可能為胰腺癌帶來治愈希望的治療手段。但是只有外科是不夠的，綜合治療必不可少。近年來，胰腺癌的化療、靶向治療以及放療等領域也有很大的進展，一些新藥和新的治療方式不斷涌現，給患者帶來了新的希望，使得這種腫瘤的治愈率、總生存率明顯改提高，生活質量也大有改善。治療方面最大的進展在于治療模式的轉變，即現在更強調多學科合作在治療中的地位。總的趨勢是治療方案越來越合理，越來越人性化、個體化。

發明內容

本發明的目的是提供一種抑制胰腺癌細胞生長的核酸分子，及其在制備胰腺癌藥物中的作用。

本發明提供了一種分離出的核苷酸分子，它的序列包括：GCUAGAGCAC?AUUCAGAAA。稱為BRSK2SR2。

在本發明中，術語“BRSK2SR2”指具有抑制胰腺癌細胞生長，并且與GCUAGAGCACAUUCAGAAA序列高度同源的核苷酸序列。該術語還包括與GCUAGAGCAC?AUUCAGAAA的同源性至少70％，較佳地至少80％，更佳地至少90％的核苷酸序列。

該術語還包括GCUAGAGCAC?AUUCAGAAA的核苷酸序列變異形式。這些變異形式包括(但并不限于)：若干個(通常為1-15個，較佳地1-10個，更佳地1-5個)核苷酸的缺失、插入和/或取代，以及在5’和/或3’端添加數個(通常為10個以內，較佳地為5個以內)核苷酸。例如，在GCUAGAGCAC?AUUCAGAAA后(3‘端)加入若干dT(脫氧胸苷)后形成的序列。

本發明還包括BRSK2SR2的DNA形式，例如GCTAGAGCAC?ATTCAGAAA。

在本發明中，可在BRSK2SR2后(3‘端)連接dTdT，從而形成GCUAGAGCAC?AUUCAGAAAdTdT。

本發明還提供了一種載體，它含有上述的核酸分子，即BRSK2SR2。

在本發明中，可選用本領域已知的各種載體，如市售的載體。比如，選用市售的載體，然后將含有本發明BRSK2SR2核苷酸序列的GCUAGAGCACAUUCAGAAAdTdT可操作地連于表達調控序列，可以形成重組載體。

如本文所用，“可操作地連于”指這樣一種狀況，即線性DNA序列的某些部分能夠影響同一線性DNA序列其他部分的活性。例如，如果信號肽DNA作為前體表達并參與多肽的分泌，那么信號肽(分泌前導序列)DNA就是可操作地連于多肽DNA；如果啟動子控制序列的轉錄，那么它是可操作地連于編碼序列；如果核糖體結合位點被置于能使其翻譯的位置時，那么它是可操作地連于編碼序列。一般，“可操作地連于”意味著相鄰近，而對于本發明的核酸分子則意味著相鄰且不影響功能。

本發明還提供了上述載體轉化的宿主細胞。

在本發明中，術語“宿主細胞”包括原核細胞和真核細胞。常用的原核宿主細胞的例子包括大腸桿菌、枯草桿菌等。常用的真核宿主細胞包括酵母細胞，昆蟲細胞、和哺乳動物細胞。較佳地，該宿主細胞是真核細胞，如CHO細胞、COS、NIT細胞等。

另一方面，本發明還提供了上述的核苷酸分子BRSK2SR2的制備方法，即按GCUAGAGCACAUUCAGAAA的序列，將各核糖核酸分子依次脫水縮合。