[發明專利]一株能產生除草活性物質的銅綠假單胞菌菌株及其粗毒素制備方法有效
| 申請號： | 201210099358.5 | 申請日： | 2012-04-09 |
| 公開（公告）號： | CN103361284A | 公開（公告）日： | 2013-10-23 |
| 發明（設計）人： | 曹宏哲;董金皋;張利輝;徐鵬;張金林 | 申請（專利權）人： | 董金皋;曹宏哲 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;A01P13/02;C12P1/04;C12R1/385 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 071001 河北省保*** | 國省代碼： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一株能 產生 除草 活性 物質 銅綠 假單胞菌 菌株 及其 毒素 制備 方法 | ||
1.一種銅綠假單胞菌菌株(Pseudomonas?aeruginosa)，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期2012年1月10日，保藏編號：CGMCCNo.5721，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號。
2.權利要求1所述銅綠假單胞菌菌株(編號CB-4)，其特征在于：此菌株粗毒素對馬唐、反枝莧、稗草、狗尾草、虎尾草等雜草均有很強的抑制效果。
3.權利要求1所述的銅綠假單胞菌菌株(編號CB-4)粗毒素的制備方法
(1)種子液制備，培養基配方：葡萄糖-10g，蛋白胨-10g，NaCl-5g，KCl-0.1g，MgSO4-0.1g，蒸餾水1000mL，調pH至6.5-7.2；
將按上述配方配制好的培養基倒入250mL三角瓶，每瓶100mL，121℃高壓滅菌30min，冷卻后在超凈臺內，無菌操作條件下，接種保存在-80℃甘油中的銅綠假單胞菌(CB-4菌株)，接種量1％，接種后放37℃，轉速180rpm的搖床中培養24h，即為種子液；
(2)發酵罐發酵，發酵罐培養液配方：葡萄糖-1％，蛋白胨-1％，NaCl-0.5％，KCl-0.01％，MgSO4-0.01％，pH6.5-7.2；
70L發酵罐按70％裝上述培養基，裝料后在120℃，0.12MPa下滅菌30分鐘。冷卻至30℃左右后按1％的比例接種制備好的種子液；培養溫度37℃，通氣量1∶1(v/vmin)，發酵至72小時完畢；
(3)將發酵液用等體積的乙酸乙酯萃取48h，期間不斷震蕩使其充分萃取，之后分液得到乙酸乙酯相，減壓濃縮至干，得到的黃綠色油膏狀物質即為粗毒素。?
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