[發明專利]膠原肽在制備降血脂藥物及保健品中的應用

無效

• 申請號: 201210098310.2
• 申請日: 2012-04-06
• 公開（公告）號: CN103356993A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 鄒漢法;靳艷;劉曉艷
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: A61K38/01
• 分類號: A61K38/01;A61P3/06;C12P21/06;A61K8/65;A23L1/305
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

技術領域

本發明涉及膠原肽，本發明制備的膠原肽具有降血脂活性，可應用于生物制品技術領域。

背景技術

膠原蛋白是地球上最豐富的蛋白質，存在于皮膚、骨頭、軟骨、肌腱等組織中，起著支撐、保護、連結等作用，脊椎生物中膠原蛋白的含量可達25-30％。膠原蛋白是由三條螺旋結構的肽鏈組成，分子量30萬道爾頓，不溶于水。膠原蛋白的三螺旋結構中有高度重復的Gly-X-Y(甘氨酸-X-Y，XY是不同的氨基酸)序列，特異性存在Gly-Pro-Hpy(甘氨酸-脯氨酸-羥脯氨酸)序列。膠原蛋白經水解后使原本包含在蛋白質中的肽段釋放出來而表現促進骨細胞分化、血管緊張素轉化酶抑制、抗氧化等生物活性，因此膠原蛋白水解所得的膠原肽廣泛應用于保健食品、化妝品等領域。膠原肽分子量小、在水中溶解性好，可穿過腸障礙進入血液系統，從而達到皮膚組織，臨床前及臨床研究已經證明膠原蛋白水解物可改善皮膚狀況(ITE?Lett.2006，7，386-390)。文獻證明膠原肽中主要成分Pro-Hyp可促進皮膚纖維細胞生長(Agric.Food?Chem.2009，57，444-449)和改善關節炎癥狀(Osteoarthritis?and?Cartilage，17(12)，1620-1627)。

隨著社會發展，人們飲食結構中脂肪含量逐漸增加而運動量卻減少，從而引起高血壓、高血脂、高血糖等一系列現代文明病。高脂血癥屬體內血脂代謝異常所致，高血脂可引發動脈粥樣硬化、冠心病、心肌梗死等心腦血管疾病。高血脂的發病人數逐年增加而且呈現低齡化趨勢，已嚴重威脅人類健康。尋找高效低副作用的降血脂藥物是醫藥領域研究的重點和熱點領域。

發明內容

本發明的目的是以動物皮、軟骨、肌腱等為原料制備膠原肽，應用于降血脂的藥物或功能性食品中。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

所述膠原肽通過如下過程制備獲得的，其以新鮮的動物皮、肌腱、骨為原料，動物原料用純水清洗干凈，粉碎為2～3平方厘米的碎片，原料按照1∶100質量比加入0.01M醋酸緩沖液，再按1∶10～500加入單一蛋白酶，于20～50℃攪拌反應1～10小時。將上述反應液的pH用1M?NaOH調至6～8，加入復合酶進行酶解，加酶量為反應物質量的0.1～1％，于20～70℃攪拌反應1～10小時，反應結束后90℃滅活20min。將上述反應液5000rpm離心5min，收集上清，冷凍干燥得到膠原肽。

酶解過程為兩步法，第一步用單酶酶解，第二步用復合酶酶解。單酶酶解所用酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶其中一種，復合酶為胰蛋白酶、風味蛋白酶、木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶或中性蛋白酶其中兩種、三種、四種或五種酶組合使用。

本發明將膠原蛋白制備成為具有降血脂功能的膠原肽。

本發明所制備的膠原肽應用時，以常規的制劑工藝，單獨使用或與其他藥物配合制備成不同的劑型，如散劑、丸劑、膠囊劑、片劑、栓劑、膏劑、酊劑、沖劑、口服液等；還可用于化妝品添加劑等。

本發明的特點如下：

1.采用本發明制備工藝所制備的膠原肽具有降血脂的功能。

2.采用本發明制備工藝，首次從膠原蛋白中獲得具有降血脂活性的肽類物質。

3.通過本發明制備的鹿膠原肽活性肽可用于藥品和功能性食品，因此具有良好的應用前景。

具體實施方式

實施例1

以新鮮牛皮為原料，按照以下工藝制備鹿膠原肽：

以新鮮的牛皮為原料，牛皮用純水清洗干凈，剪為2～3平方厘米的碎片，牛皮碎片按照1∶1質量比加入0.01M醋酸緩沖液，再按1∶10加入中性蛋白酶，于20℃攪拌反應1小時。將上述反應液的pH用1M?NaOH調至7，加入復合酶(胰蛋白酶，堿性蛋白酶)進行酶解，加酶量為反應物質量的0.1％，于20℃攪拌反應1小時，反應結束后90℃滅活20min。將上述反應液5000rpm離心5min，收集上清，冷凍干燥得到牛膠原肽。膠原肽得率為92％。膠原肽中羥脯氨酸含量采用氯氨T氧化，對甲胺基苯甲醛顯色，分光光度法測定，含量為17.9％。分子量分布采用MALD-TOF-MS測定，分子量均＜3000道爾頓。

膠原肽對高血脂大鼠的降血脂活性

膠原肽降血脂功能性評價檢測方法

1?實驗動物健康成年SD雄性大鼠(150-200g)，每組8只。

2?高脂飼料(重量比計)：78.8％基礎飼料、1％膽固醇、10％蛋黃粉和10％豬油、0.2％膽鹽。

3?劑量分組及受試樣品給予時間