[發明專利]南極假單胞菌生防菌株及其生防制劑的制備方法有效
| 申請號: | 201210097015.5 | 申請日: | 2012-03-15 |
| 公開(公告)號: | CN103031257A | 公開(公告)日: | 2013-04-10 |
| 發明(設計)人: | 何培青;林學政;黃曉航;沈繼紅 | 申請(專利權)人: | 國家海洋局第一海洋研究所 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/38 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266061 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 南極 假單胞菌生防 菌株 及其 制劑 制備 方法 | ||
1.一種南極假單胞菌生防菌株,其特征在于是從南極海冰或海泥中分離獲得的海洋細菌,鑒定確認為:參椐的生物材料(株):P4-11,分類命名為:假單胞菌Pseudomonas?sp.,分子鑒定確認為假單胞菌Pseudomonas屬,命名為Pseudomonas?sp.P4-11。?
2.如權利要求1所述的一種南極假單胞菌生防菌株,其特征在于所述的海洋細菌,其保存方法是采用試管斜面法,培養基:蛋白胨3-5g,酵母粉0.5-1g,瓊脂粉15-17g,陳海水120-200毫升,自來水800-880毫升,pH值7.0-7.2,在試管斜面上劃線接種生防菌株,于10-15℃,培養24-48小時后,于3-5℃保存。?
3.專用于南極假單胞菌生防菌株的生防制劑的制備方法,其特征在于保存的生防菌株制備發酵種子液,是將試管斜面保存的生防菌株接種于種子培養基中,該培養基的組分為:蛋白胨3-5g,酵母粉0.5-1g,陳海水120-200毫升,自來水800-880毫升,pH值7.0-7.2,于10-15℃,150轉/分鐘振蕩培養24-48小時后進行深層發酵獲得。?
4.如權利要求3所述的專用于南極假單胞菌生防菌株的生防制劑的制備方法,其特征在于制備的發酵種子液進行深層發酵,是在培養基:麩皮5-6g,酵母粉3g-4g,陳海水150毫升,自來水850毫升,滅菌后pH值為7.0-7.2條件下進行,100L發酵罐的加料量為70L,按以5-7%質量百分數接種制備的種子液,發酵溫度利用外接低溫循環水控制,罐內溫度保持在13℃±1℃;罐內壓力控制在0.02Pa;攪拌速度為220-250轉/分,通過空氣壓縮機向罐內提供發酵過程中需要的氧氣;在培養基中加入300-350毫升豆油作為消泡劑,發酵96-120小時菌株數量可達109個/毫升。?
5.如權利要求3或4所述的專用于南極假單胞菌生防菌株的生防制劑的制備方法,其特征在于深層發酵的發酵液制備生防制劑,是將假單胞菌Pseudomonas?sp.P4-11菌株的發酵液,添加生長營養元素后,制成生防菌株制劑,于常溫保存,該生長營養元素包括:硫酸銨0.15-0.19克,硫酸鋅0.4-0.54克,磷酸鈣0.3-0.59克,硝酸鉀0.82-0.92克,過磷酸鈣0.2-0.33克,硫酸鐵0.10-0.12克;硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅分別為0.0006克;生防菌株發酵液1000mL,菌株制劑外觀為淡黃色液體,活菌數量達109個/毫升。?
6.如權利要求5所述的專用于南極假單胞菌生防菌株的生防制劑的制備方法,其特征在于所制備的生防制劑可抑制或預防尖刀鐮孢菌、辣椒疫霉和大麗輪枝菌的植物病原真菌的產生。?
7.如權利要求5所述的專用于南極假單胞菌生防菌株的生防制劑的制備方法,其特征在于所制備的生防制劑稀釋5-10倍后,用于大棚黃瓜白粉病的防治。?
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