[發(fā)明專利]一種在線快速檢測(cè)劍麻皂苷的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210096618.3
• 申請(qǐng)日: 2012-03-31
• 公開（公告）號(hào): CN102608106A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郝再彬;蔣澤軍;陸冬梅;王彥超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 桂林理工大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/76
• 分類號(hào): G01N21/76
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬植物化學(xué)、天然產(chǎn)物化學(xué)、食品化學(xué)、分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、植物次生代謝物質(zhì)的生理學(xué)、植物生物活性物質(zhì)、劍麻皂苷的提取和純化及結(jié)晶、劍麻的栽培和育種、劍麻皂苷在食品、藥品中的安全檢測(cè)領(lǐng)域，特別涉及一種在線快速檢測(cè)劍麻皂苷的方法。

背景技術(shù)

劍麻皂苷的主要成分是替可吉寧，化學(xué)名稱是5α，25D-螺甾烷-3β羥基。劍麻皂苷是從生產(chǎn)劍麻纖維傳統(tǒng)產(chǎn)品之后廢棄的麻汁和麻渣中提取的天然植物皂苷元，是合成甾體激素類藥物的醫(yī)藥中間體和重要原料，廣泛應(yīng)用于腎上腺皮質(zhì)激素、性激素及蛋白同化激素三大類200多種藥物的制造。藥理研究表明，這些皂苷成分具有較明顯的抗炎、抗菌、止血、抗衰老和降血糖的生物活性。

隨著人們生活水平的不斷提高，天然藥物的使用越來越受到人們的青睞。劍麻皂苷的開發(fā)利用愈顯重要，為了提高皂苷品質(zhì)，對(duì)生產(chǎn)中皂苷含量的檢測(cè)監(jiān)控是必不可少的。目前對(duì)皂苷的檢測(cè)方法有：(1)分光光度法(孔燕君，洪美鳳2000；魯敏，李櫻紅，龔青2009；余佳芮2010)、(2)高壓液相色譜(于超，刁長(zhǎng)發(fā)，夏文娟2000；賴玲，劉華鋼等2011；袁春筱，陳志新2011)、(3)薄層掃描法(康阿龍，孫文基等2003；劉婧姝，喬衛(wèi)2011)、(4)液相質(zhì)譜聯(lián)用法(仇峰，陳笑艷，鐘大放2003；夏素霞，李國(guó)信等2011)、(5)氣相色譜法(都述虎，王曉華等2001；夏素霞，李國(guó)信等2009)、(6)毛細(xì)管電泳法(易潤(rùn)青，葉秀金，宋粉云2011)等。

各種檢測(cè)方法的優(yōu)劣分析：薄層色譜法所用的化學(xué)試劑比較多；分光光度法和毛細(xì)管電泳法檢測(cè)的步驟多、耗時(shí)；高壓液相色譜、液相質(zhì)譜聯(lián)用和氣相色譜的儀器比較貴，同時(shí)要有該專業(yè)技術(shù)人員，一般皂苷加工廠不易實(shí)現(xiàn)，另外專用色譜純的流動(dòng)相和色譜柱比較貴，生產(chǎn)的成本比較高。這幾種方法都適合于大學(xué)及研究所對(duì)皂苷的研究；相比之下，流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法操作簡(jiǎn)單，快速，檢測(cè)成本低，容易克服上述不足，做常規(guī)性測(cè)定易于被生產(chǎn)廠家所應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有檢測(cè)方法的缺陷，提供一種操作更加簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本低，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性好的魯米諾-鐵氰化鉀化學(xué)發(fā)光體系測(cè)定劍麻皂苷的方法。

具體步驟為：

(1)用0.08～0.12mol/LNaOH作為溶劑配制4.0×10^-5mol/L的魯米諾，用二次蒸餾水作為溶劑配制3.0×10^-5mol/L的鐵氰化鉀溶液，用二次蒸餾水為溶劑配制濃度為10mg/mL的皂苷標(biāo)準(zhǔn)溶液和劍麻皂苷樣品溶液；

(2)主動(dòng)泵分別將步驟(1)制備好的載流魯米諾溶液和皂苷標(biāo)準(zhǔn)溶液以30～60r/min的流速通過相應(yīng)的管道進(jìn)行三通混合，輸入流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀，待基線平穩(wěn)后，副動(dòng)泵將步驟(1)制備好的鐵氰化鉀溶液以50～80r/min的流速通過十六通注射閥，注樣時(shí)間10～25秒，各液混合，混合液流入流通池檢測(cè)其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，記錄數(shù)據(jù)；水(空白)的發(fā)光強(qiáng)度記錄為Io，混合液的發(fā)光強(qiáng)度記為Is，抑光強(qiáng)度記為ΔI(ΔI＝Io-Is)；作出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：ΔI＝1560.9x+10363，其中x以mg/mL計(jì)，濃度在0.001～5mg/ml范圍，相關(guān)系數(shù)R²＝0.9910；

(3)將步驟(1)所得劍麻皂苷樣品溶液代替皂苷標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照步驟(2)操作過程，計(jì)算出抑光強(qiáng)度ΔI，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算劍麻皂苷樣品溶液的含量；

上述測(cè)試過程均保持在35℃恒溫下進(jìn)行；上述試劑均為分析純。

在優(yōu)化的條件下，劍麻皂苷標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度在0.001～5mg/mL范圍內(nèi)與抑光強(qiáng)度ΔI呈線性關(guān)系，這表明可利用這一方法對(duì)劍麻皂苷作定量分析。

本發(fā)明所述流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光法由于其靈敏度高，重復(fù)性好，線性范圍寬，儀器設(shè)備簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)成本低，可在線進(jìn)行常規(guī)性測(cè)定，易于應(yīng)用到工業(yè)或農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例：

儀器設(shè)備：IFFM-E型流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀(西安瑞邁電子有限公司)。整個(gè)分析過程中采樣、注樣、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采集及處理，均由Windows?XP系統(tǒng)下IFFM-E型流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀完成。

材料與試劑：皂苷標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)；劍麻皂苷樣品(實(shí)驗(yàn)室自制)。

具體步驟為：