[發(fā)明專利]一種高效價肝素鈉制備新工藝

有效

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• 申請日: 2012-03-27
• 公開（公告）號: CN102603926A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發(fā)明（設計）人: 由守誼;齊東綺;苗偉;張立勇
• 申請（專利權）人: 煙臺東誠生化股份有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明屬于生化原料藥生產技術領域，尤其是涉及到高效價肝素鈉的制備工藝。

背景技術

肝素鈉是粘多糖硫酸酯類抗凝血藥，是由豬或牛的腸粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的鈉鹽，屬粘多糖類物質。肝素鈉原料藥的原料是肝素粗品，其提取只能源自健康生豬的小腸粘膜，由于含有大量雜蛋白、雜核酸、微生物等，需經過物理和化學提取分離過程，定向獲取天然結構基團完整的肝素，從而制成肝素鈉原料藥。肝素鈉原料藥是肝素制劑的有效成分和低分子肝素制劑的起始原料，目前這些制劑往往采用注射方式給藥，這使得肝素鈉原料藥需要有很高的純度，方可保證制劑的用藥安全。

現有肝素鈉提取純化方法大多采用酸堿處理去除雜質蛋白、核酸等物質，采用多次氧化的方法去除色素類物質，采用乙醇多次分級的方式去除硫酸皮膚素等雜多糖。上述酸堿處理的方式易造成核酸、色素的殘留量高，導致后續(xù)氧化次數增多；酸處理及多次氧化易導致肝素鈉部分失活，難以得到高效價的肝素鈉；多次乙醇分級易造成收率降低及物料的浪費。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于改進現有技術的不足，從而提供了一種高效價肝素鈉的生產工藝。本發(fā)明具有操作簡單、工藝時間短的特點，所得產品具有光吸收低、效價高的特點。

本發(fā)明的目的可以通過下述技術方案實現：本發(fā)明以肝素鈉粗品為原料，采用常規(guī)鹽解、酶解工藝進行預處理。預處理后的藥液首先采用離子絮凝劑進行處理，離子絮凝劑采用的離子可以是鈣離子、鋁離子，并可以通過沉淀物形式去除，其加入量為0.5～5％(W/V)；絮凝后的藥液需過濾澄清，再采用超濾膜進行超濾以除去小分子雜質及部分色素物質，超濾膜采用的孔徑范圍為2000～8000Da；超濾結束后，藥液中尚殘存少量的核酸類雜質，此時再采用帶有硅羥基的玻璃粉進行吸附處理，此時得到中控光吸收260nm合格的中間體。對此中間體藥液再進行1～2次氧化即可得到400nm光吸收合格的中間體。再對260nm、400nm合格的藥液采用改進后的溶劑進行分級，所使用的溶劑中乙醇度數為45～70度(體積百分數)，溶劑中加氯化鈉量為0.5～3.5％(W/V(溶劑體積))。沉淀經凍干后即可得到高效價的肝素鈉原料藥。

本發(fā)明生產工藝制得的產品其質量指標提高情況如下：

260nm光吸收(0.4％溶液，w/v)：小于等于0.050

400nm光吸收(0.4％溶液，w/v)：小于等于0.025

效價(EP7.0方法)：大于200IU/mg

具體實施方式

實施例1，一種高效價肝素鈉制備新工藝，是將100g肝素鈉粗品投入塑料杯中，加入1000ml純化水溶解，加入濃度3.0％(w/v)的氯化鈉，酶解3～5小時。酶解完成后，加入0.5～5％(W/V)鈣離子或鋁離子試劑反應30分鐘，離心去除絮凝沉淀物，再調pH9～10形成離子沉淀物，通過澄清過濾去除沉淀。經澄清過濾后的藥液采用2000～8000Da的超濾膜進行超濾，濾出液體積為藥液體積的三倍量。超濾后的藥液再采用經預處理的玻璃粉進行吸附，玻璃粉的加入量為藥液體積的0.1倍(V/V)，攪拌吸附30分鐘。將藥液中的玻璃粉通過過濾去除，然后在藥液中分次加入2.5％(V/V)的雙氧水，氧化結束后過濾至澄清，分級。此時，中控260nm、400nm應符合要求，否則增加一次氧化。將中控合格的沉淀溶解，再采用0.22um的濾膜過濾，用特定度數的乙醇進行分級，收集沉淀，沉淀經凍干后即可得到高效價的肝素鈉原料藥。

實施例2，一種高效價肝素鈉制備新工藝，是將10Kg肝素鈉粗品投入塑料桶中，加入100L純化水溶解，加入濃度3.0％(w/v)的氯化鈉，酶解3～5小時。酶解完成后，加入0.5～5％(W/V)鈣離子或鋁離子試劑反應30分鐘，離心去除絮凝沉淀物，再調pH9～10形成離子沉淀物，通過澄清過濾去除沉淀。經澄清過濾后的藥液采用2000～8000Da的超濾膜進行超濾，濾出液體積為藥液體積的三倍量。超濾后的藥液再采用經預處理的玻璃粉吸附，玻璃粉的加入量為藥液體積的0.1倍(V/V)，攪拌吸附30分鐘。將藥液中的玻璃粉通過過濾去除，然后在藥液中分次加入2.5％(V/V)的雙氧水，氧化結束后過濾至澄清，分級。此時，中控260nm、400nm應符合要求，否則增加一次氧化。將中控合格的沉淀溶解，再采用0.22um的濾膜過濾，用特定度數的乙醇進行分級，收集沉淀，沉淀經凍干后即可得到高效價的肝素鈉原料藥。