[發明專利]焦磷酸測序法檢測OATP1B1基因多態性的試劑盒及方法

有效

• 申請號: 201210094448.5
• 申請日: 2012-04-01
• 公開（公告）號: CN102643908A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發明（設計）人: 周宏灝
• 申請（專利權）人: 周宏灝
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏

1.一種焦磷酸測序法檢測OATP1B1基因多態性的試劑盒，其特征在于，包括如下引物：

(1)擴增引物：

上游引物：5′-ACA?CTC?TCT?TAT?CTA?CAT?AGG?TTG-3′；

下游引物：5′-GGT?ACT?ATG?GGA?GTC?TCC?CCT?ATT-3′；

其中，下游引物的5′進行生物素標記；

(2)測序引物：5′-CAC?GAA?GCA?TAT?TAC?CCA?T-3′。

2.一種應用權利要求1所述的試劑盒檢測OATP1B1基因多態性的方法，包括如下步驟：

(1)DNA提取；

(2)聚合酶鏈反應：

配制50μlPCR擴增體系，包含：10×PCR?buffer?5.0μl，dNTP?3.0μl，OATP1B1-上游引物0.5μl，OATP1B1(rs4149056)下游引物0.5μl，rTaq0.5μl，水39.5μl，模板1.0μl；循環程序為：95℃5min預變性；依次在95℃30S，55℃30S，72℃30S，進行35個循環；72℃保持5min，最終保持在4℃，得擴增產物；

(3)焦磷酸測序單鏈樣本純化；

(4)焦磷酸測序及結果分析。