[發明專利]雄性生育障礙動物模型及其制法和用途

無效

• 申請號: 201210094223.X
• 申請日: 2012-03-31
• 公開（公告）號: CN103361336A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 王鑄鋼;沈春玲;劉建兵;匡穎;費儉
• 申請（專利權）人: 上海南方模式生物研究中心;上海南方模式生物科技發展有限公司
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;C12Q1/68;G01N33/573;G01N33/68;A01K67/027;A61K49/00;A61K45/00;A61P15/00;A61P15/16
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君;雷芳

1.一種非人哺乳動物的雄性生育障礙動物模型的制備方法，其特征在于，包括步驟：

提供非人哺乳動物的細胞，將所述細胞中Prss37基因失活，以及

將所述的Prss37基因失活的細胞再生形成雄性生育障礙動物模型。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述失活是通過基因剔除、基因中斷、或基因插入而造成Prss37基因失活。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述非人哺乳動物包括嚙齒動物或靈長目動物，較佳地包括小鼠、大鼠、猴。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括：

利用ET克隆，通過同源重組剔除ES細胞中Prss37基因的exon3和exon4，從而獲得陽性ES細胞克隆；

用所述陽性ES細胞克隆制得嵌合體的嚙齒類動物，包括雄性嵌合體嚙齒類動物與雌性嚙齒類動物；

將所述雄性嵌合體嚙齒類動物與雌性嚙齒類動物進行交配，從而獲得雜合子嚙齒類動物，包括雜合子雄性嚙齒類動物與雜合子雌性嚙齒類動物；

將所述雜合子雄性嚙齒類動物與雜合子雌性嚙齒類動物交配，從而獲得Prss37基因完全失活的純合的嚙齒類動物。

5.一種用權利要求1所述方法制備的、非人哺乳動物的雄性生育障礙動物模型的用途，其特征在于，用于篩選治療或改善雄性生育障礙的物質；或用于篩選ADAM3成熟促進劑。

6.一種Prss37基因或蛋白的用途，其特征在于，用于篩選治療或改善雄性生育障礙的物質；用于篩選抑制精子與卵子結合的物質。

7.一種篩選影響精子與卵子結合的候選物質的方法，其特征在于，包括步驟：

將待測物質施用于測試組的非人哺乳動物；

檢測Prss37基因的表達或蛋白的活性；和

與對照組進行比較，其中若所述待測物質導致Prss37基因表達或蛋白活性的上調，則表示待測物質是促進精子與卵子結合的候選物質；若所述待測物質導致Prss37基因表達或蛋白活性的下調，則表示待測物質是抑制精子與卵子結合的候選物質。

8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，還包括步驟：

對獲得的促進精子與卵子結合的候選物質，進一步測試其能否治療或改善雄性生育障礙；和/或

對獲得的抑制精子與卵子結合的候選物質，進一步測試其能否作為避孕藥物。

9.一種Prss37基因或蛋白的促進劑或抑制劑的用途，其特征在于，用于制備影響精子與卵子結合的調節劑。

10.一種篩選ADAM3成熟促進劑的方法，其特征在于，包括步驟：

將待測物質施用于權利要求1所述方法制備的動物模型；和

檢測所述動物模型的成熟精子蛋白抽提物中成熟ADAM3的含量；

如果與對照相比，所述成熟ADAM3的含量升高，則所述待測物質是ADAM3成熟促進劑。

11.一種用權利要求1所述方法制備的、非人哺乳動物的雄性生育障礙動物模型，其特征在于，所述的動物模型具有以下特性：

(a)產生成熟的精子，但所述精子不能有效地與具有透明帶的卵子結合；

(b)在睪丸組織中產生ADAM3前體，但是不產生成熟的ADAM3。