[發(fā)明專利]用于檢測辣椒疫霉的LAMP引物及含有該引物的試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210093758.5 | 申請日: | 2012-03-31 |
| 公開(公告)號: | CN102586469A | 公開(公告)日: | 2012-07-18 |
| 發(fā)明(設計)人: | 孫翔;郭良棟 | 申請(專利權)人: | 中國科學院微生物研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產(chǎn)權代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飛;王加嶺 |
| 地址: | 100101 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 檢測 辣椒 lamp 引物 含有 試劑盒 | ||
1.用于檢測辣椒疫霉(Phytophthora?capsici)的LAMP引物組,其特征在于,其包括:
外側正向引物F3:5’-AACGCATATTGCACTTCCG-3’;
外側反向引物B3:5’-GCCTCCACAACCAGCAAG-3’;以及
內側正向引物FIP:5’-CATCCTCCACCGACTACACGGCCTGGGAGTATGCCTGTATCAG-3’;
內側正向引物BIP:5’-TGTTGTCCTTCGGGTCGACTGTACCACGCTTTTCGAGCAA-3’。
2.含有權利要求1所述LAMP引物組的用于檢測辣椒疫霉的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括引物FIP、BIP、F3和B3。
3.根據(jù)權利要求2所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括dNTPs、Bst?DNA聚合酶、PCR反應緩沖液中的一種或多種。
4.根據(jù)權利要求2或3所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括標準陽性模板。
5.權利要求1所述LAMP引物組或權利要求2-4任一項所述試劑盒在檢測辣椒疫霉中的應用。
6.根據(jù)權利要求5所述的應用,其特征在于,包括以下步驟:
1)提取樣品中的DNA;
2)以步驟1)中提取的DNA為模板,進行LAMP-PCR擴增反應;
3)分析PCR產(chǎn)物。
7.根據(jù)權利要求5或6所述的應用,其特征在于,PCR反應體系以25μl計為:
8.根據(jù)權利要求5或6所述的應用,其特征在于,LAMP-PCR反應條件為:65℃60分鐘,80℃2分鐘,冰上終止反應。
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