[發明專利]一種基于聚天冬氨酸衍生物的可注射水凝膠的制備方法

無效

• 申請號: 201210092418.0
• 申請日: 2012-03-31
• 公開（公告）號: CN102617867A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 馬建標;伍國琳;逯彩彩;王曉娟;王亦農;范云鴿
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: C08J3/075
• 分類號: C08J3/075;C08L79/06;C08L77/04;A61K47/34;A61L27/18;A61L27/52
• 代理公司: 天津佳盟知識產權代理有限公司 12002
• 代理人: 侯力

1.一種基于聚天冬氨酸衍生物的可注射水凝膠的制備方法，其特征在于步驟如下：

1)利用熱縮聚反應制成聚琥珀酰亞胺：

以L-天冬氨酸為原料，以磷酸為催化劑，以環丁砜和1，3，5-三甲苯的混合溶劑為反應溶劑，在氮氣氛圍和溫度為180-220℃條件下混合進行熱縮聚反應，機械攪拌4.5小時，并在反應過程中用水分離器除去反應生成的水及揮發的溶劑，然后趁熱用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶解產物，攪拌條件下在40℃水浴中恒溫2小時，使聚琥珀酰亞胺全部溶解于DMF中，將上清液倒入沉淀劑甲醇中沉淀、離心，將得到的離心產物再重復一次上述溶解、沉淀、離心的操作，將離心產物用丙酮洗滌三次，再用蒸餾水洗滌至洗滌液pH值呈中性，4000rpm離心沉淀物，50℃真空干燥24小時，得到淺粉色固體聚琥珀酰亞胺；

2)以水合肼為親核試劑進攻聚琥珀酰亞胺進行開環反應得到聚天冬酰胺：

將聚琥珀酰亞胺溶于N，N-二甲基甲酰胺中，磁力攪拌至完全溶解制得聚琥珀酰亞胺溶液，在氮氣保護的氛圍下，將水合肼溶液逐滴加入上述溶液中，滴加速度為2～5滴/分鐘，滴加完成后在24-26℃溫度下磁力攪拌反應4小時，將反應液倒入丙酮中沉淀，將抽濾得到的沉淀物溶于水中，得到棕色溶液，用透析袋透析24h，經冷凍干燥后得到的固體即為聚天冬氨酸酰肼；

3)將3-氨基丙二醇和乙醇胺依次與聚琥珀酰亞胺進行開環反應，得到聚3-氨基-1，2-丙二醇改性的聚(2-羥乙基天冬酰胺)：

將聚琥珀酰亞胺溶于N，N-二甲基甲酰胺中，磁力攪拌至完全溶解制得聚琥珀酰亞胺溶液，在氮氣的氛圍下，將3-氨基丙二醇的N，N-二甲基甲酰胺溶液逐滴加入到聚琥珀酰亞胺的溶液中，滴加速度為2～5滴/分鐘，滴加完成后，60℃回流反應8h，待體系冷卻至室溫后加入過量的乙醇胺，繼續反應6h，反應結束后用旋蒸的方法除去70％的N，N-二甲基甲酰胺，將反應液用丙酮沉淀，抽濾并用丙酮洗滌沉淀物三次，真空干燥24h，得到的產物即為聚3-氨基-1，2-丙二醇改性的聚(2-羥乙基天冬酰胺)；

4)將高碘酸鈉水溶液與聚3-氨基-1，2-丙二醇改性的聚(2-羥乙基天冬酰胺)水溶液進行氧化反應制備醛基改性的聚(2-羥乙基天冬酰胺)：

將聚3-氨基-1，2-丙二醇改性的聚(2-羥乙基天冬酰胺)水溶液和高碘酸鈉水溶液分別置于0℃的冰鹽水浴中，預冷30min后，將高碘酸鈉水溶液加入到聚(2-羥乙基天冬酰胺)水溶液中，避光反應30min，然后加入過量的乙二醇，繼續攪拌30min，所得溶液直接透析24h，冷凍干燥后得到的產物即為醛基改性的聚(2-羥乙基天冬酰胺)；

5)水凝膠的形成反應：

將聚天冬氨酸酰肼和醛基改性的聚(2-羥乙基天冬酰胺)分別溶于磷酸緩沖溶液(PBS溶液)中，置于37℃水浴下恒溫30min，將等質量濃度的兩種溶液等體積混合，體系的流動性很快變差，形成目標物水凝膠。

2.根據權利要求1所述基于聚天冬氨酸衍生物的可注射水凝膠的制備方法，其特征在于：所述熱縮聚反應中，磷酸的重量百分比濃度為85％，磷酸的的用量為每100g的L-天冬氨酸加7.5mL；反應溶劑中環丁砜與1，3，5-三甲苯的體積比為3∶7，反應溶劑的用量為每100g的L-天冬氨酸為225mL；溶解產物的N，N-二甲基甲酰胺的用量為每克產物加入4mL；上清液與沉淀劑甲醇的體積比為1∶10。

3.根據權利要求1所述基于聚天冬氨酸衍生物的可注射水凝膠的制備方法，其特征在于：所述水合肼的開環反應中，N，N-二甲基甲酰胺的用量為每克聚琥珀酰亞胺加入10mL；水合肼溶液的重量百分比濃度為85％，聚琥珀酰亞胺與水合肼的摩爾比為1∶12.5；反應液與丙酮的體積比為1∶10，透析袋的截留分子量為7000道爾頓。

4.根據權利要求1所述基于聚天冬氨酸衍生物的可注射水凝膠的制備方法，其特征在于：所述3-氨基丙二醇和乙醇胺與聚琥珀酰亞胺的開環反應中，N，N-二甲基甲酰胺的用量為每克聚琥珀酰亞胺加入10mL；3-氨基丙二醇的N，N-二甲基甲酰胺溶液中每克3-氨基丙二醇加入5mL；3-氨基丙二醇與聚琥珀酰亞胺的摩爾比為0.4-0.6∶1；乙醇胺與聚琥珀酰亞胺的摩爾比為1.5-1∶1；反應液與丙酮的體積比為1∶10。