[發明專利]人樹突狀細胞腫瘤疫苗及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210088755.2
• 申請日: 2012-03-29
• 公開（公告）號: CN102600462A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 戚春建;寧永玲;王仕忠;錢科卿
• 申請（專利權）人: 戚春建
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 常州市江海陽光知識產權代理有限公司 32214
• 代理人: 孫曉暉

1.一種人樹突狀細胞腫瘤疫苗，其特征在于：它是由β-葡聚糖誘導獲得。

2.根據權利要求1所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗，其特征在于它是由以下步驟的方法獲得：

①獲得CD14⁺外周血單核細胞和腫瘤抗原；

②用含有GM-CSF和IL-4的培養基培養步驟①獲得的CD14⁺外周血單核細胞100h～140h，獲得未成熟人樹突狀細胞；所述含有GM-CSF和IL-4的培養基中GM-CSF的濃度為80ng/mL～120ng/mL，IL-4的濃度為30ng/mL～70ng/mL；

③用β-葡聚糖誘導步驟①獲得的腫瘤抗原負載到步驟②獲得的未成熟人樹突狀細胞內，獲得人樹突狀細胞腫瘤疫苗；所述β-葡聚糖的濃度為80μg/mL～120μg/mL。

3.根據權利要求2所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗，其特征在于：步驟①中所述的CD14⁺外周血單核細胞是由血細胞分離機從人外周血中先分離獲得外周血單個核細胞，再通過磁珠分選系統從外周血單個核細胞中分選獲得。

4.根據權利要求2所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗，其特征在于：步驟①中所述的腫瘤抗原是通過生物法和/或物理法誘導腫瘤細胞凋亡而獲得。

5.根據權利要求4所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗，其特征在于：所述的生物法是采用抗腫瘤化療藥物處理腫瘤細胞使之凋亡；所述物理法是采用同位素射線照射腫瘤細胞使之凋亡，或者采用紫外線照射腫瘤細胞使之凋亡，或者對腫瘤細胞進行反復凍融使之凋亡。

6.權利要求1所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗的制備方法，其特征在于具有以下步驟：

①獲得CD14⁺外周血單核細胞和腫瘤抗原；

②用含有GM-CSF和IL-4的培養基培養步驟①獲得的CD14⁺外周血單核細胞100h～140h，獲得未成熟人樹突狀細胞；所述含有GM-CSF和IL-4的培養基中GM-CSF的濃度為80ng/mL～120ng/mL，IL-4的濃度為30ng/mL～70ng/mL；

③用β-葡聚糖誘導步驟①獲得的腫瘤抗原負載到步驟②獲得的未成熟人樹突狀細胞內，獲得人樹突狀細胞腫瘤疫苗；所述β-葡聚糖的濃度為80μg/mL～120μg/mL。

7.根據權利要求6所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗的制備方法，其特征在于：步驟①中所述的CD14⁺外周血單核細胞是由血細胞分離機從人外周血中先分離獲得外周血單個核細胞，再通過磁珠分選系統從外周血單個核細胞中分選獲得。

8.根據權利要求6所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗的制備方法，其特征在于：步驟①中所述的腫瘤抗原是通過生物法和/或物理法誘導腫瘤細胞凋亡而獲得。

9.根據權利要求8所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗的制備方法，其特征在于：所述的生物法是采用抗腫瘤化療藥物處理腫瘤細胞使之凋亡；所述物理法是采用同位素射線照射腫瘤細胞使之凋亡，或者采用紫外線照射腫瘤細胞使之凋亡，或者對腫瘤細胞進行反復凍融使之凋亡。

10.權利要求1或2所述的人樹突狀細胞腫瘤疫苗在制備抗腫瘤藥物中的應用。