[發明專利]系統性紅斑狼瘡檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201210086798.7
• 申請日: 2012-03-28
• 公開（公告）號: CN102605082A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 李為為;姜麗
• 申請（專利權）人: 解碼(上海)生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種篩查系統性紅斑狼瘡高危人群的基因無創檢測試劑盒，其特征在于：檢測CTLA4基因上A49G和T-1772C、MTHFR基因上C677T的3個單核苷酸多態性位點基因型的特異性引物與DNA檢測探針、Taq酶、dNTP混合液、反應緩沖液、SAP酶、ExoI酶、BigDye?mix、EDTA溶液、70％乙醇溶液、100％乙醇溶液、HIDI溶液、ddH₂O等。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的特異性引物對是指針對CTLA4基因上A49G和T-1772C、MTHFR基因上C677T的3個單核苷酸多態性(SNPs)位點，能特異性擴增出包含這3個SNPs位點的DNA片段的引物對。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的DNA測序引物是針對CTLA4基因上A49G和T-1772C、MTHFR基因上C677T的3個SNPs位點而設計，能通過DNA測序技術特異性檢測出上述3個SNPs位點基因型的DNA測序引物。

4.根據權利要求1所示的試劑盒，其特征在于，所含的3對特異性引物序列如下：

(1)CTLA4(A49G)正向引物：5’-CTGAACACCGCTCCCATAAA-3’

CTLA4(A49G)反向引物：5’-GAATACAGAGCCAGCCAAGC-3’

(2)CTLA4(T-1772C)正向引物：5’-CACAGAAGCAAAGAACCCAT-3’

CTLA4(T-1772C)反向引物：5’-TGTATGTGGGTAGGAGATGGA-3’

(3)MTHFR(C677T)正向引物：5’-AGGGAGGCTTCAACTACGC-3’

MTHFR(C677T)反向引物：5’-GCGGTTGAGGGTGTAGAAGT-3’。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所含的3條DNA測序引物序列如下：

(1)CTLA4(A49G)測序引物：5’-CTGAACACCGCTCCCATAAA-3’

(2)CTLA4(T-1772C)測序引物：5’-CACAGAAGCAAAGAACCCAT-3’

(3)MTHFR(C677T)測序引物：5’-AGGGAGGCTTCAACTACGC-3’。

6.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于試劑盒的組分和含量包括：

(1)PCR反應體系：10×PCR反應緩沖液2.5ul，25mM?dNTP混合液0.2ul，?5U/ul?Taq?DNA聚合酶0.125ul，20uM特異性引物對，每條引物各0.25ul，ddH₂O?19.175ul。

(2)PCR產物純化體系：1U/ul?SAP酶0.75ul，10U/ul?ExoI酶0.375ul，ddH₂O?3.875ul。

(3)測序反應體系：25％?BigDye?mix1ul，3.2uM?DNA測序引物1ul，125mMEDTA溶液1ul，100％乙醇溶液15ul，70％乙醇溶液30ul，HIDI溶液8ul，ddH₂O2ul。

本試劑盒供一人份檢測應用，試劑盒的保存溫度為-20℃。?