[發明專利]一種分子標記輔助回交提高小麥抗赤霉病擴展的方法

無效

• 申請號: 201210085179.6
• 申請日: 2012-03-28
• 公開（公告）號: CN102599047A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 馬正強;薛樹林;李國強;郜忠霞
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種分子標記輔助回交提高小麥抗赤霉病擴展的方法，其特征是包括以下步驟：

1)以攜帶抗擴展QTL的重組自交家系為供體，以綜合性狀優良但感赤霉病的小麥品系為受體，進行常規有性雜交，所得的雜種F₁代再與輪回親本回交，得到回交一代BC₁F₁分離群體，種植于田間；

2)在苗期提取BC₁F₁分離群體中各單株的DNA，并利用與目標QTL緊密連鎖的SSR標記進行PCR檢測，選擇含有目標等位基因的雜合型單株繼續與輪回親本雜交獲得BC₂F₁分離群體；

3)在苗期提取BC₂F₁分離群體中各單株的DNA，繼續利用與目標QTL緊密連鎖的SSR標記進行PCR檢測，篩選含有目標QTL的雜合型單株；再選擇分布于整個小麥基因組的150對SSR標記用于對含有目標QTL的單株進行背景回復率分析，選擇背景回復率最高的單株繼續回交獲得BC₃F₁分離群體；

4)重復步驟3)，獲得攜帶目標QTL且背景回復率最高的BC₃F₁目標單株后自交獲得BC₃F₂分離群體，種植于田間；

5)在苗期提取BC₃F₂分離群體中各單株的DNA，重復步驟3)，選擇攜帶目標QTL且背景回復率最高的純合型單株自交，獲得BC₃F₃純合家系。

2.根據權利要求1所述的分子標記輔助回交提高小麥抗赤霉病擴展的方法，其特征是所述PCR檢測的方法包括以下步驟：

1)用SDS法提取各世代群體中單株的DNA。

2)利用與目標QTL?Qfhs.nau-3B緊密連鎖的兩側SSR標記ZMB67和HBE383對上述基因組DNA進行PCR擴增。

3)對PCR擴增產物進行聚丙烯酰胺凝膠電泳，分析帶型。在供體親本中ZMB67的擴增條帶為110bp，HBE383的擴增條帶為245bp。凡呈現有與供體親本相同大小的DNA條帶的單株即為目標單株。

3.根據權利要求1所述的分子標記輔助回交提高小麥抗赤霉病擴展的方法，其特征是利用隨機選擇的SSR標記進行背景選擇包括以下步驟：

1)根據小麥遺傳圖譜選擇分布于21條染色體的150對SSR標記用于目標單株的PCR擴增；

2)對PCR擴增產物進行凝膠電泳，分析帶型，計算背景回復率；攜帶有最多的與受體親本完全一致帶型的單株即為目標單株，用于下一代回交或自交。

4.根據權利要求1所述的分子標記輔助回交提高小麥抗赤霉病擴展的方法，其特征是所述的供體為從南大2419×望水白重組自交系群體中選出的攜帶抗擴展QTL?Qfhs.nau-3B的家系SSD129；所述的受體為綿陽99-323，所述的輪回親本為綿陽99-323。