[發明專利]一粒小麥抗白粉病基因Mlm2033的分子標記及其應用

無效

• 申請號: 201210085158.4
• 申請日: 2012-03-28
• 公開（公告）號: CN102653758A
• 公開（公告）日: 2012-09-05
• 發明（設計）人: 馬正強;付必勝
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于分子遺傳學領域，涉及小麥抗白粉病基因Mlm2033的分子標記及其應用。

背景技術

小麥是全球最主要的糧食作物，在中國也是僅次水稻的第二大糧食作物。目前，世界小麥每年的產量約為6.2億噸，提供了人類所需的1/5能量，小麥的生產關乎著人類生存。普通小麥是一個異源六倍體物種，含有A、B、D三個不同的染色體組，與小麥基因組具有同源或部分同源的野生種及原始種中蘊含了豐富的基因資源。利用小麥種質資源中優異的等位變異是實現小麥穩產、增產的關鍵因素。

小麥白粉病是由子囊菌綱中高度專性寄生的禾谷白粉菌小麥?；虰lumeria?graminis?f.sp.tritici侵染而引起的一種氣傳病。它引起的小麥白粉病是由一種嚴重的小麥葉部病害。病菌侵染小麥后，吸收植株營養，使小麥植株的光合能力下降甚至完全喪失，最終導致成穗數、穗粒數和千粒重下降，能夠導致小麥產量損失5％～34％，嚴重時能達到45％甚至絕收。

在眾多的的小麥白粉病防治措施中，培育和推廣抗病品種最為經濟有效并且環保。當前生產上抗白粉病利用的主要是質量抗性基因。但是，由于白粉病質量抗性具有小種專化性，病原菌的無毒基因與抗性基因進行協同進化，在生產上大面積推廣使用單一抗病品種很容易導致產生新的毒性小種，從而使所攜帶的抗病基因喪失其抗性。從小麥種質資源中發掘與利用新的抗白粉基因是小麥遺傳學家和育種家們的一個長期目標與挑戰。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的上述不足，提供小麥抗白粉病基因Mlm2033的分子標記。

本發明的另一目的是提供該小麥抗白粉病基因Mlm2033的分子標記應用。

本發明的目的可通過如下技術方案實現：

小麥抗白粉病基因Mlm2033的分子標記，所述的分子標記MAG5827；

所述的分子標記MAG5827：

左端引物序列為SEQ?ID?NO.1，

右端引物序列為SEQ?ID?NO.2，

擴增產物為282bp，此分子標記來自一粒小麥TA20337AL染色體，為共顯性分子標記，利用Mapmaker?Macintosh?V?2.0測得與Mlm2033基因的遺傳距離為0.4cM。

所述的分子標記在小麥種質資源中抗白粉病基因的鑒定和轉移中的應用。

一粒小麥抗白粉病基因Mlm2033的分子標記方法，用以下的任意一對分子標記引物PCR擴增待檢小麥基因組DNA，并檢測擴增產物：

分子標記MAG5827：

左端引物序列為SEQ?ID?NO.1，

右端引物序列為SEQ?ID?NO.2；

如果用引物MAG5827能夠擴增出282bp的擴增片段，則標志著待檢小麥存在抗白粉病基因Mlm2033。

一種篩選抗白粉病小麥的方法，其特征在于用權利要求1所述的引物對之一擴增待檢小麥基因組DNA，如果用引物MAG5827能夠擴增出282bp的擴增片段，則標志該待檢小麥為存在抗白粉病Mlm2033的抗白粉病小麥。

上述小麥抗白粉病基因Mlm2033的分子標記可通過以下方法獲得：

(一)TA2033與M389F₂代的創建與表型鑒定：

(1)栽培一粒小麥TA2033與栽培一粒小麥M389(♀)進行雜交得到雜種F₁，F₁自交產生F₂群體。

(2)F₂代群體單株種植于穴盤，放置溫室，白天22度14小時，晚上18度10小時。一葉一心期接種白粉病，接種7天后進行抗性調查。鑒定結果見表1。

(3)F₂代單株調查后將感病植株移苗大田，自交所得種子為F₃家系。每個F₃家系中選擇18粒進行子代測驗。

(4)通過對F₂進行遺傳分析，推定抗病種質中攜帶的抗病基因的個數。

(二)多態性分子標記篩選

(5)將6株抗病F₂單株的葉片等量混合成抗池，6株感病F₂單株的葉片等量混合成感池。用SDS法(Ma?and?Sorrells，1995)提取抗病親本TA2033、感病親本M389、抗池和感池的DNA，應用簡單重復序列標記SSR與BSA(Bulk?segregant?analysis)結合的方法進行多態性篩選。