[發明專利]一種降解煤化工廢水中苯酚的方法

無效

• 申請號: 201210083400.4
• 申請日: 2012-03-27
• 公開（公告）號: CN102583782A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 馬玉龍;任佳;劉海艷
• 申請（專利權）人: 寧夏大學
• 主分類號: C02F3/34
• 分類號: C02F3/34;C02F101/34
• 代理公司: 寧夏專利服務中心 64100
• 代理人: 古玲玉

1.一種降解煤化工廢水中苯酚的方法，其特征在于：該方法包括如下步驟：

a.種子制備：從枯草芽孢桿菌保存管中挑取一環接入富集培養基中，菌株經活化和擴大培養后，按質量百分比為1~5%的接種量接種于富集培養基中，在溫度為20~40℃下好氧培養24~72h，可得用于馴化的降解菌；

b.降解菌的馴化：取上述步驟a制得的種子按質量百分比1~5%的接種量接入含100mg/L苯酚的基礎選擇培養基中，在溫度為20~40℃，攪拌速率為100~130r/min下好氧培養24~72h后，取培養后的培養液按質量百分比1~5%的接種量再接種于含200mg/L苯酚的基礎選擇培養基中，與上述相同條件下培養24~72h，以此類推，即取前一步驟培養后的培養液按質量百分比1~5%的接種量接種于苯酚含量比前一步驟高100mg/L的基礎選擇培養基中，與上述相同條件下培養24~72h，最后一次是取前一步驟接種培養后的培養液，按質量百分比1~5%的接種量接種于含1000mg/L苯酚的基礎選擇培養基中，與上述相同條件下培養24~72h；

c.單菌落的分離：選擇上述步驟b濁度最大的培養液，稀釋后涂布于含300mg/L苯酚的基礎選擇固體培養基瓊脂平板，在溫度為20~40℃下培養24~72h，長出的單菌落在平板上劃線純化2次，得到形態不同的單菌落菌株；

d.降解苯酚種子擴大培養：取上述步驟c制得的不同形態單菌落菌株，分別接入到含300mg/L苯酚的富集培養基中，在溫度為20~40℃，攪拌速率為100~130r/min下好氧培養24~72h，可得用于降解苯酚的種子；

e.苯酚降解菌的選擇：將上述步驟d制得的降解苯酚的種子，按質量百分比1~5%的接種量分別接入添加0、100、200、……、900、1000mg/L苯酚的煤化工廢水中，在溫度為20~40℃，攪拌速率100~130r/min下好氧培養24~72h后對苯酚濃度進行測定，選出使含量為0～200mg/L煤化工廢水中的苯酚能完全降解的菌株；

f.將上述步驟e選出的苯酚降解菌，接入富集培養基經擴大培養后，按質量百分比1~5%的接種量接入煤化工廢水中，在溫度為20~40℃，攪拌速率100~130r/min下好氧培養24~72h，即可降解煤化工廢水中的苯酚。

2.如權利要求1所述的一種降解煤化工廢水中苯酚的方法，其特征在于：所述富集培養基，基礎選擇培養基，基礎選擇固體培養基制備方法分別是：

1）富集培養基的制備：將下述重量的原料混合而成即可制得富集培養基：蛋白胨5.0g，牛肉浸出汁3.0g，NaCl?5.0g，MnSO₄·H₂O?0.01g，水1000mL；

2）基礎選擇培養基的制備：將下述重量的原料混合而成即可制得基礎選擇培養基：K₂HPO₄?0.5g，KH₂PO₄?0.5g，NaCl?0.2g，NH₄NO₃?1.0g，MgSO₄?0.2g，CaCl₂?0.2g，MnSO₄·H₂O?0.01g，水1000mL；

3）基礎選擇固體培養基的制備：將下述重量的原料混合而成即可制得基礎選擇培養基：K₂HPO₄?0.5g，KH₂PO₄?0.5g，NaCl?0.2g，NH₄NO₃?1.0g，MgSO₄?0.2g，CaCl₂?0.2g，MnSO₄·H₂O?0.01g，瓊脂20g，水1000mL；

如權利要求1所述的一種降解煤化工廢水中苯酚的方法，其特征在于：所述步驟b的含100、200、……、900、1000mg/L苯酚的基礎選擇培養基是由基礎選擇培養基1000mL分別和100、200、……、900、1000mg苯酚混合而成。

3.如權利要求1所述的一種降解煤化工廢水中苯酚的方法，其特征在于：所述步驟c的含300mg/L苯酚的基礎選擇固體培養基是由基礎選擇培養基1000mL、苯酚300mg和瓊脂20g混合而成。