[發(fā)明專利]指導(dǎo)華法林使用起始劑量快速基因分型的方法和試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210082350.8 | 申請日： | 2012-03-26 |
| 公開（公告）號： | CN102605076A | 公開（公告）日： | 2012-07-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 汪道文;崔廣林;丁虎 | 申請（專利權(quán)）人： | 汪道文 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京天奇智新知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11340 | 代理人： | 楊文錄 |
| 地址： | 430030 湖北省武漢市*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 指導(dǎo) 華法林 使用 起始 劑量 快速 基因 方法 試劑盒 | ||
1.一種指導(dǎo)華法林使用起始劑量快速基因分型的方法，該方法通過提取受試者外周血細胞的基因組DNA特異性的擴增出CYP2C9*3(1061?A/C)和VKORC1(-1639?G/A)位點的擴增產(chǎn)物，擴增產(chǎn)物在進行熔解曲線分析過程中隨著溫度逐漸升高，使擴增產(chǎn)物的DNA解鏈，熒光染料從局部解鏈的DNA分子上釋放，通過檢測熒光信號隨溫度的變化即可得到擴增產(chǎn)物的熔解曲線，根據(jù)熔解曲線的形狀從而可以判斷是否存在突變位點以及突變位點的基因型，所采用的引物具有序列表SEQ?ID?2和5所示的堿基序列：其中SEQ?ID?2和3所示序列為CYP2C9*3(1061?A/C)位點F和R引物序列，SEQ?ID?4和5所示序列為VKORC1(-1639?G/A)位點F和R引物序列。
2.一種指導(dǎo)華法林使用起始劑量快速基因分型的試劑盒(10人份)，其特征在于由以下試劑組成：125μl?2×GC?Buffer?I緩沖液(TaKaRa)，40μl?dNTP混合液，50μl超純水，各10μl?10μM/L的正向引物和反向引物，5μl的熱啟動酶，5μl飽和熒光染料SYTO9(美國Invitrogen公司)。F和R引物是序列表SEQ?ID?2-5所示的堿基序列。試劑盒保存溫度為-20度。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的所述方法，其中外周血為靜脈EDTA抗凝血。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的所述方法，其中DNA為人基因組DNA。
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