[發明專利]一種治療豬圓環病的卵黃抗體及其復合物的生產方法在審
| 申請號: | 201210080839.1 | 申請日: | 2012-03-26 |
| 公開(公告)號: | CN102580088A | 公開(公告)日: | 2012-07-18 |
| 發明(設計)人: | 王慶福;劉易通;李振天 | 申請(專利權)人: | 廣東紫金正天藥業有限公司 |
| 主分類號: | A61K39/395 | 分類號: | A61K39/395;C07K16/08;A61P31/20;A61K36/00;A61K31/715 |
| 代理公司: | 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214 | 代理人: | 李彥孚 |
| 地址: | 廣東省河源市*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 治療 圓環 卵黃 抗體 及其 復合物 生產 方法 | ||
技術領域
本發明涉及一種治療豬圓環病的卵黃抗體及其復合物的生產方法屬于動保行業獸醫獸藥領域,所提供卵黃抗體及其復合物可用于豬圓環病的臨時預防和免疫失敗后的緊急治療。
背景技術
圓環病毒最早發現于1974年德國學者Tischer等的科研工作;后來的試驗證實,來源于豬腎組織的該種病毒基因組由單股環狀的DNA組成,由此得名為豬圓環病毒(porcine?circovirus,PCV)。按照國際病毒分類委員會第六次學術報告新增病毒科的結論,PCV在分類上屬于圓環病毒科、圓環病毒屬,是已知的最小的動物病毒之一。該科病毒科內尚無具體的分屬標準,共同特征為病毒粒子無囊膜,基因組由一條單股、環狀的DNA鏈組成。被列入該科的動物病毒有豬圓環病毒、雞傳染性貧血病病毒,鸚鵡喙羽病病毒、鴿圓環病毒、金絲雀圓環病毒和人的TT病毒(一種肝炎病毒)等。?
目前的研究認為豬圓環病毒粒子直徑14~17nm,呈20面體對稱結構,無囊膜,含有共價閉合的單股環狀負鏈DNA,基因組大小約為1.76kb。PCV對外界理化因子的抵抗力相當強,即便在PH3的酸性環境及72℃的高溫環境中也能存活一段時間,氯仿作用不失活,無血凝活性。
現已知PCV有兩個血清型,即PCV1和PCV2。PCV1基本上無致病性;PCV2被認為是引起斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)的主要病原,此外還有皮炎/腎病綜合征、繁殖障礙、呼吸道病復合癥、先天性震顫及中樞神經系統疾病等多種臨床疾病類型。不同年齡的豬對PCV2均具有較強的易感性,感染豬可自鼻液、糞便等廢物中排出病毒,傳染途徑為口腔和呼吸道。
目前的研究表明,PCV2主要在機體的單核/巨噬細胞中復制,少數可在腎小球、支氣管上皮細胞、內皮細胞、肝細胞和淋巴細胞中增殖。一方面,PCV2與其它病毒,如豬繁殖與呼吸道綜合征病毒和PPV同時接種試驗豬時,這些病毒可以刺激和活化免疫系統,從而促進感染豬體內PCV2的增殖。因此,免疫系統的激活可能是PMWS的觸發因素。另一方面,PCV2感染也使機體產生嚴重的淋巴組織病變,包括淋巴細胞的缺失及淋巴組織免疫細胞亞群的變化,這就使機體的免疫力下降,從而對其它病原不能產生有效的免疫應答,也是該病發生的重要機理。因此,豬感染PCV后免疫刺激與免疫抑制同時存在,這給疾病防御帶來很大困難。
在獸醫臨床上,具有抗病毒作用的化學藥物已被禁用;傳統中藥制劑主要通過提高機體自身免疫水平來實現降低發病率,雖有一定作用但存在效果不穩定的問題;而疫苗免疫甚至不足10%,形成PCV感染普遍存在的局面,造成的經濟損失幾乎是毀滅性的。因此,急需一種可用于豬圓環病的臨時預防和免疫失敗后緊急治療的藥物。
發明內容
本發明提供了一種用于豬圓環病的臨時預防和免疫失敗后緊急治療的藥物___抗豬圓環病卵黃抗體及其復合物,能與圓環病毒發生免疫學反應,同時提高機體自身免疫水平,用于豬圓環病的臨時預防和緊急治療。
一種治療豬圓環病的卵黃抗體及其復合物的生產方法,其生產過程如下:
(1)、購買豬圓環病毒2型滅活疫苗(LG株)、豬圓環病毒2型(SH株)存儲于4~8℃備用;
(2)、購買道地藥材板藍根、黃芪、白術、甘草,按一定比例配伍后加水煎煮,取其濃縮液干燥粉碎后作為中藥提取物密封備用;
(3)、購買經檢疫合格的SPF蛋雞雛作隔離飼養;
(4)、于70日齡給全雞群做豬圓環病毒2型滅活疫苗(LG株)、豬圓環病毒2型(SH株)胸部雙側皮下注射各2頭份;
(5)、于77日齡給全雞群做豬圓環病毒2型滅活疫苗(LG株)、豬圓環病毒2型(SH株)胸部雙側皮下注射各5頭份;
(6)、于90日齡給全雞群做豬圓環病毒2型滅活疫苗(LG株)、豬圓環病毒2型(SH株)胸部雙側皮下注射各10頭份;
(7)、于210日齡給全雞群做豬圓環病毒2型滅活疫苗(LG株)、豬圓環病毒2型(SH株)胸部雙側皮下注射各15頭份;
(8)、收集150~360日齡的雞蛋保存在4℃環境備用;
(9)、在超凈臺上收集蛋黃,按3倍比例加入滅菌蒸餾水攪拌30分鐘以上,配成均一的蛋黃液,轉移至4℃環境冷藏、靜置12小時,用過濾氣泵回收上清液;
(10)、將含卵黃抗體的蛋黃上清液依次通過0.45微米和0.22微米的濾膜進行超濾濃縮,收集介于兩種濾膜之間的物質即為卵黃抗體的濃縮液;
(11)、將卵黃抗體濃縮液做50~56℃減壓干燥,制成卵黃抗體干粉;
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