[發明專利]APOB的RNAi調節及其用途

無效

• 申請號: 201210080793.3
• 申請日: 2005-09-26
• 公開（公告）號: CN102628044A
• 公開（公告）日: 2012-08-08
• 發明（設計）人: 于爾根·蘇賽克;漢斯-彼得·沃爾洛赫爾;菲利普·哈德維格;薩伊達·埃爾巴希
• 申請（專利權）人: 阿爾尼拉姆醫藥品有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K48/00;A61P3/06;A61P9/10;A61P7/02
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平

1.一種由有義鏈和反義鏈組成的iRNA試劑，其中所述的有義鏈的序列選自SEQ?ID?No：1、3、5、21、23、25、27、29、33、35、39、41、43、45、49、51、55、57、59、61、63、65、69、71、73、77、79、83、93、95、97、99、105、107、109、117、121、123、125、127、129、131、133、135、137、143、145、147、153、155、157、159和161，與所述有義鏈對應的的反義鏈的序列選自SEQ?ID?No：2、4、6、22、24、26、28、30、34、36、40、42、44、46、50、52、56、58、60、62、64、66、70、72、74、78、80、84、94、96、98、100、106、108、110、118、122、124、126、128、130、132、134、136、138、144、146、148、154、156、158、160和162，其中每條鏈中不超過3個核苷酸分別被其它核苷酸所替代，同時基本保持了抑制培養的人HepG2細胞中ApoB表達的能力。

2.根據權利要求1所述的iRNA試劑，其中每條鏈中不超過2個核苷酸分別被其它核苷酸所替代。

3.根據權利要求1所述的iRNA試劑，其中每條鏈中不超過1個核苷酸分別被其它核苷酸所替代。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的iRNA試劑，其中所述替代是腺苷被尿嘧啶所替代。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的iRNA試劑，其中，所述iRNA試劑使與這些試劑孵育后培養的人HepG2細胞中存在的ApoB?mRNA的量與沒有與該試劑孵育的細胞相比降低了50％以上，和/或使分泌到人HepG2細胞培養上清中的Apo蛋白的量降低了50％以上，和/或使該iRNA試劑以50mg/kg體重或者100mg/kg體重給藥后，將C57B1/6小鼠的鼠肝臟細胞中所存在的apo-B?mRNA的量在體內降低至少20％。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的iRNA試劑，其包括硫代磷酸酯或者2’-修飾的核苷酸。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的iRNA試劑，其包括：

5’-尿苷-腺嘌呤-3’(5’-UA-3’)二核苷酸，其中所述的尿苷是2’-修飾的核苷酸；

5’-尿苷-鳥嘌呤-3’(5’-UG-3’)二核苷酸，其中所述的5’-尿苷是2’-修飾的核苷酸；

5’-胞苷-腺嘌呤-3’(5’-CA-3’)二核苷酸，其中所述的5’-胞苷是2’-修飾的核苷酸；

或者5’-尿苷-尿苷-3’(5’-UU-3’)二核苷酸，其中所述的5’-尿苷是2’-修飾的核苷酸。

8.根據權利要求7所述的iRNA試劑，其中在所有出現的序列基序5’-UA-3’、5’-CA-3’、5’-UU-3’和5’-UG-3’二核苷酸中的最5’端嘧啶都是2’-修飾的核苷酸，

或者在有義鏈中的所有嘧啶以及在所有出現的5’-UA-3’和5’-CA-3’的最5’端嘧啶都是2’-修飾的核苷酸，

或者其中在有義鏈中的所有嘧啶都是2’-修飾的核苷酸，以及在反義鏈中所有出現的序列基序5’-UA-3’、5’-CA-3’、5’-UU-3’和5’-UG-3’中的最5’端嘧啶都是2’-修飾的核苷酸。

9.根據權利要求6所述的iRNA試劑，其中所述的2’-修飾選自2’-脫氧、2’-脫氧-2’-氟、2’-O-甲基、2’-O-甲氧乙基(2’-O-MOE)、2’-O-氨基丙基(2’-O-AP)、2’-O-二甲基氨基乙基(2’-O-DMAOE)、2’-O-二甲基氨基丙基(2’-O-DMAP)、2’-O-二甲基氨基乙氧基乙基(2’-O-DMAEOE)和2’-O-N-甲基乙酰氨基(2’-O-NMA)的組。

10.根據權利要求1-9中任一項所述的iRNA試劑，其進一步含有膽固醇部分，其中所述的膽固醇部分連接到所述iRNA試劑有義鏈的3’-末端。

11.根據權利要求1-5中任一項所述的iRNA試劑，其為由序列如SEQ?ID?No：153所示的有義鏈和序列如SEQ?ID?No：154所示的反義鏈組成的試劑1。