[發明專利]高純度脂肽、脂肽膠束及其制備方法

有效

• 申請號: 201210080777.4
• 申請日: 2001-01-18
• 公開（公告）號: CN102671181A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: T.J.凱萊赫;賴正吉;J.P.德庫西;P.D.林奇;M.澤諾尼;A.R.塔利亞尼
• 申請（專利權）人: 卡比斯特制藥公司
• 主分類號: A61K38/08
• 分類號: A61K38/08;A61K9/10;A61P31/04;G01N30/02;C07K7/06;C07K1/18;C07K1/16
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 陳桉

1.純化的達托霉素組合物，其含有達托霉素，其相對于表3中所示的雜質為至少93％純的，所述達托霉素通過包括以下步驟的方法來純化：

a.在溶液中形成達托霉素聚集體；

b.在使所述達托霉素聚集體保留在過濾器上的條件下對所述溶液進行過濾；

c.從過濾器中收集所述達托霉素聚集體；和

d.由所述達托霉素聚集體得到純化的達托霉素。

2.權利要求1的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括通過以下步驟來得到用于形成步驟1a中的達托霉素聚集體的達托霉素：

a.將達托霉素加載于陰離子交換樹脂；

b.在pH?6.5用30mM?NaCl水溶液洗滌所述陰離子交換樹脂上的達托霉素；和

c.在pH?6.0-6.5用300mM?NaCl水溶液從所述陰離子交換樹脂中洗脫達托霉素。

3.權利要求1-2中任一項的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括如下得到步驟2a中的達托霉素：

a.發酵玫瑰孢鏈霉菌以在發酵肉湯中產生達托霉素；

b.使所述發酵肉湯澄清以得到加載于步驟2a中的陰離子交換樹脂的達托霉素。

4.權利要求1-3中任一項的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括以下步驟：

a.使步驟1d中的達托霉素與HIC樹脂結合；

b.洗滌與所述HIC樹脂結合的達托霉素；

c.用有機相溶劑使達托霉素從所述HIC樹脂中移出；和

d.在達托霉素聚集體呈單體和非膠束狀態的條件下從所述HIC樹脂中得到達托霉素制劑。

5.權利要求4的組合物，其中所述HIC樹脂包括HP-20ss樹脂，且所述有機相溶劑包括異丙醇。

6.權利要求4-5中任一項的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括以下步驟：使在步驟4d中從所述HIC樹脂中得到的達托霉素與陰離子交換樹脂接觸以降低有機溶劑在所述達托霉素制劑中的量。

7.權利要求1-6中任一項的組合物，其中所述陰離子交換樹脂為FP-DA13樹脂，且所述達托霉素聚集體包括達托霉素膠束。

8.權利要求1-7中任一項的組合物，其中所述達托霉素由具有表3中所示任意雜質1至14中一種或多種的達托霉素來純化。

9.權利要求1-8中任一項的組合物，其中所述達托霉素通過以下方法來純化，所述方法還包括以下步驟：

a.將含有通過發酵玫瑰孢鏈霉菌而得到的達托霉素的經澄清的肉湯加載于陰離子交換樹脂；

b.在pH?6.5用30mM?NaCl水溶液洗滌所述陰離子交換樹脂上的達托霉素；

c.在pH?6.0-6.5用300mM?NaCl水溶液從所述陰離子交換樹脂中洗脫達托霉素；

d.在由步驟9c得到的達托霉素中形成達托霉素膠束聚集體；

e.在使所述達托霉素膠束保留在過濾器上的條件下對步驟9d中得到的達托霉素膠束進行過濾；

f.將來自步驟9e的經過濾的達托霉素膠束加載于HIC樹脂；

g.在pH?3.5-6.5用異丙醇從步驟10f中的HIC樹脂中洗脫達托霉素；

h.將步驟9g的洗脫液中的達托霉素加載于陰離子交換樹脂；

i.從步驟9h的陰離子交換樹脂中洗脫純化的達托霉素。