[發(fā)明專利]結(jié)合構(gòu)建體及其使用方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210080699.8
• 申請(qǐng)日: 2003-12-24
• 公開（公告）號(hào): CN102643344A
• 公開（公告）日: 2012-08-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J·A·萊德貝特;M·S·海登-萊德貝特;P·A·湯普遜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 新興產(chǎn)品開發(fā)西雅圖有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/46
• 分類號(hào): C07K16/46;A61K39/395;A61P35/00;A61P35/02;A61P29/00;A61P19/02;A61P21/04;A61P3/10;A61P25/00;A61P37/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權(quán)陸軍;劉健

1.非-自然產(chǎn)生的單鏈蛋白，其包含：i)第一個(gè)多肽，其具有能結(jié)合靶分子的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽，所述的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽包含重鏈可變區(qū)，所述的重鏈可變區(qū)包含在一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基處的氨基酸取代或缺失；ii)第二個(gè)多肽，其包含附著到所述的第一個(gè)多肽上的連接區(qū)；和iii)第三個(gè)多肽，其包含附著到第二個(gè)多肽上的N-末端截短的免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)多肽，其中所述的非-自然產(chǎn)生的單鏈蛋白具有至少一種免疫活性。

2.非-自然產(chǎn)生的單鏈蛋白，其包含：i)第一個(gè)多肽，其具有能結(jié)合靶分子的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽，所述的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽包含重鏈可變區(qū)，后者包含在位置9、10、11、12、108、110、112處的一個(gè)或多個(gè)氨基酸缺失或取代；ii)第二個(gè)多肽，其包含附著到所述的第一個(gè)多肽上的連接區(qū)；和iii)第三個(gè)多肽，其包含附著到第二個(gè)多肽上的N-末端截短的免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)多肽，其中所述的非-自然產(chǎn)生的單鏈蛋白能具有至少一種免疫活性，且其中所述的蛋白與沒有氨基酸缺失或取代的所述蛋白相比，具有提高的重組表達(dá)或穩(wěn)定性。

3.非-自然產(chǎn)生的單鏈Fv蛋白，其包含：i)第一個(gè)多肽，其具有能結(jié)合靶細(xì)胞上的靶分子的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽，所述的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽包含重鏈可變區(qū)，其中在重鏈可變區(qū)的第一個(gè)構(gòu)架區(qū)域內(nèi)的位置11處的亮氨酸是缺失的，或被另一種氨基酸取代；ii)第二個(gè)多肽，其包含附著到所述的第一個(gè)多肽上的連接區(qū)；和iii)第三個(gè)多肽，其包含附著到第二個(gè)多肽上的N-末端截短的免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)多肽，其中所述的非-自然產(chǎn)生的單鏈蛋白(1)能結(jié)合所述的靶分子和(2)能具有依賴抗體的細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒性和補(bǔ)體固定和(3)能減少靶細(xì)胞的數(shù)目。

4.非-自然產(chǎn)生的單鏈Fv蛋白，其包含：i)第一個(gè)多肽，其具有能結(jié)合靶分子的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽，所述的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽包含重鏈可變區(qū)，其中在重鏈可變區(qū)的第一個(gè)構(gòu)架區(qū)域的位置11處的亮氨酸被替換為絲氨酸；其中與不具有所述的氨基酸取代的蛋白相比，所述的蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中具有提高的表達(dá)或穩(wěn)定性；ii)第二個(gè)多肽，其包含附著到所述的第一個(gè)多肽上的連接區(qū)；和iii)第三個(gè)多肽，其包含附著到第二個(gè)多肽上的N-末端截短的免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)多肽，其中所述的非-自然產(chǎn)生的單鏈Fv蛋白能夠具有至少一種免疫活性。

5.非-自然產(chǎn)生的單鏈Fv蛋白，其包含i)第一個(gè)多肽，其具有能結(jié)合靶分子的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽，所述的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽包含重鏈可變區(qū)，其中在重鏈可變區(qū)的第一個(gè)構(gòu)架區(qū)域的位置11處的亮氨酸被替換為絲氨酸；和ii)第二個(gè)多肽，其包含附著到所述的第二個(gè)多肽上的N-末端截短的IgE免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)多肽，其中所述的非-自然產(chǎn)生的單鏈蛋白能夠具有至少一種免疫活性。

6.非-自然產(chǎn)生的單鏈蛋白，其包含：第一個(gè)多肽，其包含能結(jié)合靶分子的結(jié)合結(jié)構(gòu)域多肽；第二個(gè)多肽，其包含附著到所述的第一個(gè)多肽上的連接區(qū)；第三個(gè)多肽，其包含附著到第二個(gè)多肽上的N-末端截短的免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)多肽，其中所述的連接區(qū)包含第一個(gè)、第二個(gè)和第三個(gè)半胱氨酸殘基，其中所述的第一個(gè)半胱氨酸殘基是在所述的第二個(gè)半胱氨酸的N-末端，且所述的第二個(gè)半胱氨酸是在所述的第三個(gè)半胱氨酸的N-末端，其中所述的第二個(gè)和第三個(gè)半胱氨酸殘基中的1個(gè)或2個(gè)是取代的或缺失的，且其中所述的非-自然產(chǎn)生的單鏈蛋白能夠具有至少一種免疫活性。

7.減少受試者中的靶細(xì)胞群體的方法，包含給所述的受試者施用治療有效量的蛋白，其小于約150kD，其包含下述步驟：a)用能結(jié)合所述的靶細(xì)胞群體內(nèi)的細(xì)胞的第一種蛋白或肽，處理靶細(xì)胞群體，和b)用能實(shí)現(xiàn)下述的至少一項(xiàng)的第二種蛋白或肽，處理靶細(xì)胞群體：i)結(jié)合Fc受體，ii)誘導(dǎo)靶細(xì)胞的細(xì)胞凋亡，或iii)固定補(bǔ)體，其中所述的第一種蛋白或肽分子直接地連接到所述的第二種蛋白或肽分子，或者，任選地，所述的第一種蛋白或肽分子和所述的第二種蛋白或肽分子通過第三種蛋白或肽分子相連，且其中所述的蛋白分子不是抗體、TNF家族或TNF受體家族的成員，且不能綴合細(xì)菌毒素、細(xì)胞毒性的藥物或放射性同位素。