[發(fā)明專利]一種轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210079420.4
• 申請日: 2012-03-23
• 公開（公告）號: CN102577981A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設計）人: 陳明娜;禹山林;楊慶利;潘麗娟;王冕;遲曉元;楊珍;陳娜;王通;和亞男
• 申請（專利權）人: 山東省花生研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，包括如下步驟：

（1）將已經(jīng)誘導分化出叢生芽的花生組培苗轉移到壯苗培養(yǎng)基A上20天，10天更換一次培養(yǎng)基，所述壯苗培養(yǎng)基A的組分為MS培養(yǎng)基，所用激素為細胞分裂素6-BA；

（2）將長至1.5cm以上的組培苗分成單株，移至壯苗培養(yǎng)基B上20-25天，10天更換一次培養(yǎng)基，所述壯苗培養(yǎng)基B的成分為MS培養(yǎng)基，所用激素為0.4?mg/L的細胞分裂素6-BA和0.1mg/L的生長素NAA；

（3）待苗長至2.5~4cm，移至生根培養(yǎng)基生根，所述生根培養(yǎng)基的成分為1/2?MS培養(yǎng)基，所用激素為生長素IBA和NAA，濃度分別為3mg/L和0.3mg/L。

2.根據(jù)權利要求1所述的轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，其特征在于：所述步驟（1）中的培養(yǎng)基A厚度為1.5cm。

3.根據(jù)權利要求1所述的轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，其特征在于：所述將已經(jīng)誘導分化出叢生芽的花生組培苗轉移到壯苗培養(yǎng)基A上時，將生長較好的芽用無菌手術刀分成單株，并切除底部與培養(yǎng)基接觸形成的黑褐色部分，底部莖端沒入培養(yǎng)基2~3mm培養(yǎng)，將一些尚未成型的芽分成幾個芽叢培養(yǎng)。

4.根據(jù)權利要求1所述的轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，其特征在于：所述步驟（2）中的培養(yǎng)基B的厚度為1.5cm。

5.根據(jù)權利要求1所述的轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，其特征在于：所述選取長至1.5cm以上的組培苗單株移至壯苗培養(yǎng)基B上，切除底部與培養(yǎng)基接觸形成的黑褐色部分，底部莖端沒入培養(yǎng)基2~3mm培養(yǎng)。

6.根據(jù)權利要求1所述的轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，其特征在于：所述步驟（3）中的生根培養(yǎng)基的厚度為2~2.5cm。

7.根據(jù)權利要求1所述的轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，其特征在于：所述將經(jīng)過壯苗長至2.5~4cm高的組培苗移至生根培養(yǎng)基上15~30天，待生出3條以上的根，根長超過2cm，肉質莖超過兩個節(jié)間，即可進行煉苗、移栽。

8.根據(jù)權利要求7所述的轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，其特征在于：所述步驟（3）的生根培養(yǎng)到15天后，若生根情況仍達不到要求，需要在原培養(yǎng)基上層再倒0.6~1cm厚生根培養(yǎng)基，新加培養(yǎng)基需用水浴涼至34~36℃，將組培瓶傾斜沿瓶壁緩緩倒入。

9.根據(jù)權利要求1~8任一所述的轉基因花生組培苗壯苗、生根的方法，其特征在于：所述步驟（1）和步驟（2）所用光照強度均為4000Lx，生根階段光照強度調整到5000Lx。