[發(fā)明專利]牛奶過(guò)敏原檢測(cè)板及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210079402.6
• 申請(qǐng)日: 2012-03-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102636650A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-08-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李會(huì)強(qiáng);常艷敏;李廼昶;任杰;孫輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 沃克（天津）生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/558
• 代理公司: 天津市宗欣專利商標(biāo)代理有限公司 12103
• 代理人: 董光仁

1.一種牛奶過(guò)敏原檢測(cè)板的制備方法，包括矩形PVC墊板（1）上兩端分別設(shè)置吸水材料的待測(cè)樣本區(qū)（1）和吸附區(qū)（8），其特征在于：待測(cè)樣本區(qū)（1）和吸附區(qū)（8）中間依次設(shè)置有膠體金標(biāo)記抗原（3），在硝酸纖維素膜（5）上分別包被牛奶中酪蛋白、β乳球蛋白、α乳白蛋白組成牛奶過(guò)敏原（4）的檢測(cè)區(qū)T和包被抗-β乳球蛋白抗體（6）的質(zhì)控區(qū)C，

其中，在經(jīng)膜處理液浸泡過(guò)的硝酸纖維素膜（5）上，將牛奶過(guò)敏原4和抗-β乳球蛋白抗體（6），按照順序分別點(diǎn)樣于規(guī)劃的檢測(cè)區(qū)T和質(zhì)控區(qū)C,牛奶過(guò)敏原（4）的總蛋白濃度和抗-β乳球蛋白抗體（6）總蛋白濃度均為1.8-2.2毫克/毫升，一次點(diǎn)樣，每個(gè)點(diǎn)樣孔0.2毫升，室溫溫育2小時(shí)；蒸餾水及膜處理液沖洗后，用2%聚乙烯醇溶液室溫封閉1小時(shí)；棄去封閉液，蒸餾水、膜處理液沖洗，干燥后裁剪置于PVC墊板1上；

另將酪蛋白，β乳球蛋白，α乳白蛋白分別標(biāo)記膠體金，混合制備膠體金標(biāo)記抗原3，并置于PVC墊板1上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述牛奶過(guò)敏原檢測(cè)板的制備方法，其特征在于：牛奶過(guò)敏原4是牛奶中酪蛋白、β乳球蛋白、α乳白蛋白等濃度比例混合后作為已知抗原點(diǎn)樣。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述牛奶過(guò)敏原檢測(cè)板的制備方法，其特征在于：膠體金標(biāo)記抗原3的制備方法是：每50?ml膠體金溶液分別加入0.6?ml?1mg/ml的酪蛋白溶液、0.8?ml?1mg/ml的β乳球蛋白溶液、0.?5?ml?1mg/ml的α乳白蛋白溶液，攪拌后再分別加入3?ml?1%?聚乙二醇溶液，離心去上清，分別用0.3?mg/ml的聚乙二醇溶液懸浮沉淀，離心后，再用同樣溶液懸浮，測(cè)定A_520nm至1.45-1.55，加入終濃度為0.5?mg/ml疊氮鈉防腐，分別標(biāo)記后等體積混合，4℃靜置保存，備用。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述牛奶過(guò)敏原檢測(cè)板，包括矩形PVC墊板（1）上兩端分別設(shè)置吸水材料的待測(cè)樣本區(qū)（2）和吸附區(qū)（8），其特征在于：待測(cè)樣本區(qū)（1）和吸附區(qū)（8）中間依次設(shè)置有膠體金標(biāo)記抗原（3）、在硝酸纖維素膜（5）上分別包被牛奶過(guò)敏原（4）的檢測(cè)區(qū)T和包被抗-β乳球蛋白抗體（6）的質(zhì)控區(qū)C。