[發明專利]α-淀粉酶的截斷體及其應用

無效

• 申請號: 201210079326.9
• 申請日: 2012-03-23
• 公開（公告）號: CN102719418A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發明（設計）人: 王成華;黃日波;王青艷;申乃坤;陳東;黎貞崇;黃志民
• 申請（專利權）人: 廣西科學院
• 主分類號: C12N9/28
• 分類號: C12N9/28;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12P19/14;C12P7/06;D06L1/00;C12R1/125
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 黃永校

1.α-淀粉酶的截斷體，其特征在于：刪除了親本α-淀粉酶N端或/和C端的一個或多個氨基酸殘基，同時引入或者不引入人工設計的多肽，改造得到一個新的α-淀粉酶變體，該變體具有改善了的比活力、和/或轉化數、和/或催化效率、和/或耐溫性、和/或最適pH、和/或耐酸性、和/或底物代謝譜，所述親本α-淀粉酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。

2.根據權利要求1所述的α-淀粉酶的截斷體，其序列特征選自下組：

a)刪除了N端44個氨基酸，序列組成為序列表SEQ?ID?NO：1中的氨基酸45至660組成的氨基酸序列；和/或

b)刪除了C端196個氨基酸，序列為序列表SEQ?ID?NO：1中的氨基酸45-467組成的氨基酸序列；和/或

c)在N端引入了一個人工合成肽HHHHHHGSGSGDDDDKA，其序列組成如SEQ?ID?NO：3所示；和/或

d)在N端引入了一個人工合成的組氨酸純化標簽；和/或

e)在C端引入了一個人工合成的組氨酸純化標簽；

3.編碼權利要求1和權利要求2的α-淀粉酶的截斷體的基因。

4.根據權利要求3所述的基因，其核苷酸序列組成如SEQ?ID?NO：2和SEQ?ID?NO：4所示。

5.一種表達載體，其特征在于：包含權利要求3或者權利要求4所述的基因。

6.一種宿主細胞，其特征在于：包含權利要求5中所述的表達載體轉化的原核細胞或真核細胞。

7.用于產生權利要求1和權利要求2中任一項的α-淀粉酶的截斷體的方法，其包括：序列比對，結構建模，基于結構疊合的序列比對，截斷體位置的設計，純化標簽的添加，變體α-淀粉酶結構的分子動力學評估。

8.用于產生權利要求1和權利要求2中任一項的α-淀粉酶的截斷體蛋白質的方法，其包括：(a)在有益于所述多肽產生的條件下培養權利要求6的重組宿主細胞；和(b)回收所述多肽。

9.權利要求1和權利要求2中任一項的α-淀粉酶的截斷體在淀粉降解和含淀粉材料的處理中的應用。

10.根據權利要求9的應用，其包括淀粉液化、生產麥芽糊精、尤其是用于淀粉工業中新型糊化、液化和糖化新工藝的開發中的應用。