[發明專利]一種桉葉脂肪酸成分測定方法

有效

• 申請號: 201210078225.X
• 申請日: 2012-03-12
• 公開（公告）號: CN102621242A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 吳志華;黃赤夫;謝耀堅;楊巧麗;張婧
• 申請（專利權）人: 國家林業局桉樹研究開發中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 湛江市三強專利事務所 44203
• 代理人: 龐愛英

1.一種桉葉脂肪酸成分測定方法，其特征是按以下步驟：

(1)樣品脂肪酸甲酯化或乙酯化

甲酯化：將提取物置于三角瓶中，加入濃度為1％硫酸甲醇溶液，加入量為1g/50mL，充分振蕩，55℃水浴加熱回流1小時，取出靜置后，加入溶劑，加入量為提取物與溶劑之比1g/50mL，振蕩均勻并靜置30分鐘，取上清液放入離心管中10000rpm下離心10分鐘，離心后取上清部分作為分析試樣；

乙酯化：將提取物置于三角瓶中，加入濃度為0.5mol/L的NaOH乙醇溶液，加入量為1g/10mL，充分振蕩，80℃水浴加熱5-10分鐘，加入三氟化硼-乙醚溶液與無水乙醇配制的混合溶液，加入量為1g/20mL，80℃水浴加熱10分鐘，取出冷卻，加入飽Nacl溶液，加入量1g/70mL，和正己烷，加入量1g/4mL，振搖混勻，靜置分層，取上層液進行分析試樣；所述三氟化硼-乙醚溶液與無水乙醇配制的混合溶液按體積比1∶3配制；

(2)GC-MS聯用儀測定

A.色譜條件

進樣口溫度253℃，流速1mL/分鐘，進樣量1.0μL，分流比20∶1；

B.程序升溫

初溫80℃，保持1.1分鐘，以17℃/分鐘升至240℃，保持0.7分鐘，再以1℃/分鐘升至253℃，保持4分鐘；

C.質譜條件

EI電離源，電子能量70eV，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，EM電壓1024V，質量掃描范圍40～600u；

(3)標準溶液配制及標準曲線制作

配制各種濃度的標準成分溶液，以標準系列濃度為橫坐標，標準目標化合物定量離子峰面積為縱坐標制作標準曲線，然后分別以GC-MS進行測定，并保證檢測的GC-MS條件與所述色譜條件、程序升溫及質譜條件一致；

(4)脂肪酸定性、定量分析

根據利用GC-MS譜圖庫進行的自動檢索或根據標準成分，對脂肪酸成分進行定性分析；對色譜峰面積歸一化法確定脂肪酸成分的相對百分含量或與相應的標準曲線方程比較獲得含量。

2.根據權利要求1所述桉葉脂肪酸成分測定方法，其特征是所述步驟(1)樣品脂肪酸甲酯化或乙酯化。

3.根據權利要求1所述桉葉脂肪酸成分測定方法，其特征是所述溶劑為正己烷。

4.根據權利要求1所述桉葉脂肪酸成分測定方法，其特征是所述步驟(4)脂肪酸定性、定量分析時，樣品譜圖與標準譜圖庫匹配度在0.9以上，與標準樣品出峰時間差小于2秒。