[發明專利]用于特異地檢測抗性生物的培養基

無效

• 申請號: 201210074560.2
• 申請日: 2006-02-09
• 公開（公告）號: CN102605040A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: S·奧倫加;C·羅歇-達爾貝特;J·佩里;V·尚特佩德里;G·扎姆巴爾迪;N·巴爾
• 申請（專利權）人: 拜奧默里克斯公司
• 主分類號: C12Q1/34
• 分類號: C12Q1/34;C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 羅菊華

本申請是申請日為2006年2月9日、申請號為200680004645.6、發明名稱為“用于特異地檢測抗性生物的培養基”的發明專利申請的分案申請。

本發明領域是通過生物化學方法的微生物學分析的領域，并且特別是檢測和鑒定微生物例如尤其是細菌或酵母的領域。

細菌對抗生素的抗性是主要的公共衛生問題。感染性微生物對治療的抗性與抗感染分子同時形成，并且目前代表了治療中的主要障礙。這種抗性負責多種問題的根源，包括實驗室檢測的困難，有限的治療選擇和對臨床結果的有害影響。

特別地，在過去20年中致病性細菌抗性的快速且抑制不住的增加代表了醫學中的主要流行問題之一。由這些生物引起的感染是住院時間延長的原因，并且與治療失敗后的高發病率和死亡率相關。

在一個菌株中可以同時涉及幾種抗性機制。它們一般分為3類：抗生素不能滲透到細菌中，通過細菌的酶系統來使抗生素失活或排出，以及細菌靶和抗生素之間缺乏親和力。

就所涉及的物種和抗生素的數目而言，酶促失活是獲得性抗性的最常見的機制。因此，染色體C類頭孢菌素酶目前構成革蘭氏陰性菌中占優勢的抗性機制之一，革蘭氏陰性菌表達對頭孢菌素類具有抗性的此類酶。類似地，β-內酰胺酶是由某些細菌表達的酶，其能夠水解β-內酰胺環(其是β-丙氨酸類家族的抗生素的基本結構)的C-N鍵，從而產生在微生物學上失活的產物。已開發了幾種β-內酰胺酶抑制劑(BLI)，例如克拉維酸(CA)、三唑巴坦和舒巴坦，以增加抗微生物活性并擴展與之相關的β-丙氨酸類的譜系。由于這些抑制劑充當β-內酰胺酶的自殺底物，因而防止了抗生素的酶促降解并允許它們有效對抗最初有抗性的細菌。然而，由于菌株持續暴露于抗生素壓力，所以細菌通過β-內酰胺酶的連續且動態的產生而表現出它們的適應能力，所述β-內酰胺酶在形成新分子的同時進行進化。

因此，產生高水平染色體C類頭孢菌素酶(céphalosporinases?chromosomiques?de?classe?C?haut?niveau)的革蘭氏陰性細菌(稱為Case?HN細菌)，以及產生廣譜β-內酰胺酶(β-lactamases?à?spectre?étendu)的革蘭氏陰性細菌(因而稱為BLSE細菌)，已成為日益增加的威脅，特別是因為所涉及的細菌種類數目日益增加。CaseHN和BLSE細菌不僅對基于第1代和第2代青霉素類和頭孢菌素類的治療有抗性，還對第3代頭孢菌素類(C3G)(頭孢噻肟CTX、頭孢他啶CAZ、頭孢泊肟CPD、頭孢曲松CRO)和單環內酰胺類(氨曲南ATM)有抗性。相反地，7α-甲氧基頭孢菌素類(頭霉素：頭孢西丁、頭孢替坦)和碳青霉烯類(亞胺培南、美羅培南、厄他培南(ertapenem))一般保持了其活性。BLSE被β-內酰胺酶抑制劑(BLI)抑制，這使得能夠將它們與其他頭孢菌素酶區別開。

因此，這些細菌最常同時表現出針對幾種治療的抗性，這對于建立相關治療和避免治療失敗造成了困難。因此，大腸桿菌(Escherichia?coli)可以是Case?HN和BLSE。此外，因為BLSE陽性腸細菌有通過菌株的克隆傳遞或質粒結合轉移而散布抗性的趨勢，所以它們代表了傳染控制方面的問題。在大多數研究中，大腸桿菌和肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella?pneumoniae)仍是最常見的產生BLSE的物種。然而，幾年以來，BLSE已大大擴展了它們的宿主物種的名單。因為，許多腸細菌和非發酵型革蘭氏陰性桿菌(例如銅綠假單胞菌(Pseudomonas?aeruginosa))物種也已報道為BLSE的生產者。

除了這些BLSE細菌外，還可以提及的是金黃色葡萄球菌(Staphylococcus?aureus)，它也是形成了許多抗性機制的致病性細菌，例如對于甲氧西林、青霉素、四環素、紅霉素、萬古霉素的抗性。屎腸球菌(Enterococcus?faecium)是在醫院環境中發現的另一種多重抗性的細菌，它可以抵抗青霉素、萬古霉素和利奈唑胺。結核分枝桿菌(Mycobacterium?tuberculosis)通常對異煙肼和利福平具有抗性。其他病原體提供了某些抗性，例如沙門氏菌屬(Salmonella)、彎曲桿菌屬(Campylobacter)和鏈球菌屬(Streptococcus)。

因此，從公共衛生觀點看來，能夠盡快地鑒定此類微生物和此類抗性機制是非常必要的。

一般地，對治療有抗性的微生物的尋找按照下列步驟進行：

1.獲取可能包含所述微生物的生物樣品；

2.接種并孵育培養基(18-48小時)以誘導微生物的指數生長；

3.在培養基上定位潛在重要的微生物的菌落；