[發明專利]腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體豬瘟疫苗及其應用

無效

• 申請號: 201210073529.7
• 申請日: 2012-03-20
• 公開（公告）號: CN102600481A
• 公開（公告）日: 2012-07-25
• 發明（設計）人: 仇華吉;孫元
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K39/12;A61K39/187;A61K39/145;A61P31/14;A61P31/20;C12N15/861;C12N7/01
• 代理公司: 北京市德權律師事務所 11302
• 代理人: 余光軍

1.一種腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體疫苗,其特征在于，包括：復制缺陷性人5型腺病毒、日本腦炎病毒復制子和待表達的抗原基因。

2.按照權利要求1所述的腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體疫苗，其特征在于：在日本腦炎病毒復制子SpeI位點前插入質粒pCI的內含子序列；所述質粒pCI的內含子序列的核苷酸序列為SEQ?ID?No.1所示。

3.按照權利要求1所述的腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體疫苗，其特征在于：待表達的抗原基因位于JEV復制子載體的SpeI和SalI位點之間。

4.按照權利要求1-3任何一項所述的腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體疫苗，其特征在于：所述的待表達的抗原基因是豬瘟病毒E2基因、豬藍耳病病毒GP5基因、豬圓環病毒2型Cap基因或豬流感病毒HA基因。

5.?權利要求1-3任何一項所述的腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體疫苗在制備動物疫苗中的用途。

6.一種構建1-3任何一項所述腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體疫苗的方法，包括以下步驟：

（1）將日本腦炎病毒復制子插入到腺病毒穿梭載體中；（2）將來自pCI載體的嵌合內含子以及待表達的抗原基因插入到日本腦炎病毒復制子中，得到重組轉移載體；（3）將轉移載體線性化后轉化含有腺病毒骨架載體的感受態細胞，得到重組腺粒；（4）將重組腺粒線性化后轉染細胞，傳代直至出現細胞病變，得到含有表達抗原基因的腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體疫苗。

7.按照權利要求6所述的方法，其特征在于：步驟（1）中所述的腺病毒穿梭載體包括pShuttle、pShuttle-CMV、pAdTrack或pAdTrack-CMV；優選為pShuttle-CMV。

8.按照權利要求6所述的方法，其特征在于：步驟（2）中在日本腦炎病毒復制子SpeI位點前插入質粒pCI的內含子序列；待表達的抗原基因插入到JEV復制子載體的SpeI和SalI位點之間。

9.腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體豬瘟疫苗，其微生物保藏號是：CGMCC.5825。

10.權利要求9所述的腺病毒/日本腦炎病毒復制子嵌合載體豬瘟疫苗在制備預防日本腦炎病毒或/和豬瘟病毒的疫苗中的用途。