[發明專利]一種非水相體系中生物轉化制備關附庚素的方法

無效

• 申請號: 201210072970.3
• 申請日: 2012-03-20
• 公開（公告）號: CN102618596A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 余伯陽;劉吉華;夏燁;劉靜涵
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C12P17/18
• 分類號: C12P17/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種非水相體系中生物轉化制備關附庚素的方法。

背景技術

黃花烏頭是主產于我國北方的藥用植物，其塊根稱為關白附，屬常用中藥。現代藥理學研究表明關白附中主要活性成分為一類C₂₀赫替新型二萜生物堿，其中鹽酸關附甲素已開發成我國的原創一類新藥，是一種療效顯著的新型抗心律失常藥物。關附庚素是關白附中的主要活性成分之，是關附甲素的單乙酯產物，其對氯仿誘發的小鼠室顫，烏頭堿誘發的大鼠室性心律失常有明顯的對抗作用，其抗心律失常作用優于關附甲素。由于關附庚素的自然來源十分有限，限制了其在制藥領域的應用。關附胺醇也是關白附中的主要化學成分之一，其含量在藥材中數倍于關附甲素與關附庚素。由于關附胺醇沒有抗心律失常等藥理活性，在關附甲素的提取過程中獲得的大量副產品關附胺醇被棄之不用，造成了極大的資源浪費。為了有效利用植物資源并提高天然微量活性成分關附庚素的來源，我們發明了一種非水相體系中生物轉化關附胺醇制備關附庚素的方法。該方法具有反應條件溫和、對環境友好、反應具有高度選擇性和可控性、反應過程簡單、產品易于分離、催化劑脂肪酶可重復使用等優點，具有積極的社會效益和經濟價值。

發明內容

本發明的目的在于提供一種制備微量活性天然產物關附庚素的非水相酶催化方法，它是一種在非水相有機溶劑中酶法催化關附胺醇生產關附庚素的技術，該技術具有高度的立體選擇性，操作簡單，對環境友好。

本發明解決該技術問題所采用的技術方案是：

一種非水相體系中生物轉化制備關附庚素的方法，通過以下技術方案來實現：

1)將關附胺醇、乙酰基供體在非水相介質中混合，加入分子篩去除微量水分，然后加入脂肪酶催化反應2-48小時；

2)將步驟1所得反應液，過濾去除脂肪酶和未溶解的關附胺醇，回收的脂肪酶和底物可重復利用，所得濾液經減壓蒸發去除溶劑；

3)將步驟2所得剩余物以硅膠柱層析分離，結晶即可獲得產品關附庚素；

所述關附胺醇與酰基供體的摩爾比為1∶1-15，脂肪酶的用量為關附胺醇重量的0.1-5％，分子篩用量為0.1-5g/L，攪拌或搖床振蕩速度50-200rpm，反應時間2-48小時，反應溫度20-60℃。

所述的非水相體系中生物轉化制備關附庚素的方法，其特征為所述的有機相溶劑是甲醇、乙醇、正丁醇、丙酮、正己烷、環己酮、乙酸乙烯酯、環己烷、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、四氫呋喃、吡啶、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、叔丁醇中的其中一種物質或幾種物質的混合物。

所述的非水相體系中生物轉化制備關附庚素的方法，其特征為所述的脂肪酶催化劑為Candida?antarctica?lipase?B、Porcine?pancreas、Rhizopus?niveus、Asperyillus?niger、Penicillium?camemberti、Mucor?javanicus、Burkholderia?cepacia其中一種或幾種物質的混合物。

所述的非水相體系中生物轉化制備關附庚素的方法，其特征為酰基供體為乙酸乙烯酯、丙酸乙烯酯、丁酸乙烯酯、戊酸乙烯酯、己酸乙烯酯、辛酸乙烯酯、月桂酸乙烯酯、苯甲酸乙烯酯其中一種或幾種物質的混合物。

本發明的有益效果是：

1.本發明將沒有抗心律失常等生物活性的天然產物關附胺醇轉化為具有良好抗心律失常活性的關附庚素，充分利用并保護了自然資源。開拓了天然微量活性成分關附庚素的新來源。

2.酶促催化立體選擇性好，反應條件溫和，環境友好。

3.催化及脂肪酶可以重復利用，工藝成本低廉。

附圖說明

圖1脂肪酶在非水介質中選擇性催化關附胺醇合成關附庚素

具體實施方式

為了更好地理解本發明，下面通過實施例進一步說明本發明。應該理解的是，本發明實施例的制備方法僅僅用于說明本發明，而不是對本發明的限制，在本發明催化制備關附庚素的構思前提下，類似的制備方法都屬于本發明要求保護的范圍。

實施例1：