[發明專利]一種測定再生水生物穩定性的方法

有效

• 申請號: 201210072764.2
• 申請日: 2012-03-19
• 公開（公告）號: CN102660628A
• 公開（公告）日: 2012-09-12
• 發明（設計）人: 胡洪營;趙欣;蔣豐;許雪喬
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06
• 代理公司: 西安智大知識產權代理事務所 61215
• 代理人: 賈玉健

技術領域

本發明屬于水質分析技術領域，具體涉及一種測定再生水生物穩定性的方法。

背景技術

我國水資源短缺日益加劇，再生水已成為缺水城市重要的水資源。隨著再生水處理技術與工藝的不斷發展，再生水廠出水水質能滿足工業利用、景觀利用、城市雜用等多方面的用水要求。然而，在輸配與利用的過程中，再生水的水質有可能會發生一定程度的劣化。其中，微生物生長是再生水水質劣化最為關注的問題之一，可導致濁度、嗅味等物理感官指標的上升，同時在人體暴露過程中產生潛在的健康風險。此外，在輸配管網及工業冷卻等系統中，微生物在管壁附著生長形成生物膜，可造成管道的腐蝕和堵塞等問題，具有很大的危害。因此，對再生水輸配與利用過程中微生物生長進行控制是非常必要的。

去除水中支持微生物生長的有機物是保障水質生物穩定性的關鍵手段。生物可同化有機碳(AOC)是評價水質生物穩定性的重要指標。在飲用水領域，目前國內外廣泛采用的AOC測定方法是以荷蘭van?der?Kooij教授1982年提出的方法為基礎(Journal?of?American?Water?Works?Association，74卷10期，540-545頁)，通過測定模式細菌Pseudomonas?fluorescens?P17和Spirillum?sp.NOX在水樣中的最大生物量來換算得到AOC濃度。與飲用水相比，再生水水質差異較大，有機物組成及濃度水平均不同，來源于飲用水及其水源水的測試菌種不能或難以在再生水中生長，測定結果遠低于實際濃度，使得測定結果不能準確表征再生水水質生物穩定性。另外，以上方法的測定時間較長，一般為6～9天，實驗效率不高。因此需要開發適于再生水水質條件的AOC測定新方法。

發明內容

為了克服上述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種測定再生水生物穩定性的方法，能夠應用于再生水水質生物穩定性的評價，具有易于實現、成本低廉的特點。

為達到上述目的，本發明所采取的技術方案為：

一種測定再生水生物穩定性的方法，包括如下步驟：

步驟1：制作標準曲線，具體步驟如下：

1)乙酸碳標準溶液的配制：以乙酸鈉作為標準物質，將預設量的乙酸鈉溶于磷酸鹽緩沖液中，配制乙酸碳濃度范圍為100～8000μg/L的標準溶液N種，N為大于2的整數，配制好的標準溶液用0.2μm濾膜過濾除菌；

2)接種測試菌種：首先在50mL具塞錐形瓶中分別加入30～40mL的所述N種標準溶液的一種，分別接種ZJ2和G3菌，接種濃度為10⁴CFU/mL，兩種菌種各做N^/個平行樣，N^/為大于2的整數，然后將接種后的標準溶液培養在溫度為22～25℃培養箱中靜置黑暗培養3天，培養至細菌生長穩定期；

3)細菌濃度測定：對步驟1中2)接種后的標準溶液中的濃度進行測定，采用平板計數法，平板培養基為營養瓊脂，培養溫度為25℃，培養時間為1天；

4)計算產率系數：將不同乙酸碳濃度下的細菌濃度進行線性擬合，得到標準曲線，取標準曲線的斜率即為產率系數；

步驟2：測定再生水樣AOC濃度，具體步驟如下：

1)準備待測水樣：首先用0.2μm濾膜過濾水樣，然后根據需要將其pH值調節為6～8，得到待測水樣，同時取磷酸鹽緩沖液作為空白對照樣，將空白對照樣同樣用0.2μm濾膜進行過濾；

2)接種測試菌種：首先在50mL具塞錐形瓶中分別加入30～40mL的所述待測水樣和空白對照樣，在待測水樣和空白對照樣中分別接種ZJ2和G3菌，接種濃度為10⁴CFU/mL，兩種菌種各做M^/個平行樣，M^/為大于2的整數，然后將接種后的水樣培養在溫度為22～25℃培養箱中靜置黑暗培養3天，培養至細菌生長穩定期；

3)細菌濃度測定：對步驟2中2)接種后的水樣中的濃度進行測定，采用平板計數法，平板培養基為營養瓊脂，培養溫度為25℃，培養時間為1天；

4)計算AOC濃度：用步驟2中3)測定的細菌濃度減去空白對照樣的細菌濃度，再除以步驟1中4)得到的產率系數，即可得到AOC值，分別計算待測水樣利用ZJ2、G3菌測得的AOC值，選取二者較大者作為水樣的AOC濃度。