[發明專利]一種核酸分子及其應用

有效

• 申請號: 201210071712.3
• 申請日: 2012-03-16
• 公開（公告）號: CN102533770B
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 張必良;尹夢回;馮世鵬;王瑋;克雷格·梅洛
• 申請（專利權）人: 廣州市銳博生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/68;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司44224
• 代理人: 萬志香,郭元杰

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，具體是涉及一種核酸分子及其應用。

背景技術

microRNA(簡寫miRNA)是目前研究最熱門的非編碼小RNA之一，它是一類長度約為22bp，由dicer酶從有特定二級結構的前體剪切加工成熟的，通過與mRNA完全或不完全配對來調節基因表達的RNA分子，它屬于非編碼小RNA家族的一員，在物種之間是保守的。miRNA參與調節細胞的生長，繁殖，分化，調亡等生命過程。超過一半的人類miRNA基因在基因組的位置被認為與癌癥有關，如脆性位點，擴增相關的窄位點區，或者斷裂位點區。

miRNA基因在核內由RNA聚合酶II(Pol II)轉錄為初級前體(primary miRNA，簡寫pri-miRNA)，pri-miRNA含一個7甲基鳥嘌呤(7-mG)的帽子和多聚腺苷酸的尾(PolyA)，這些是RNA聚合酶II轉錄體的特征，pri-miRNA還包含stem-loop結構，pri-miRNA被III類RNA酶(RNase III)Drosha切割為約70bp的前體miRNA(precursor miRNA，簡寫pre-miRNA)，其它側翼序列被認為在核內被降解(Lee Y，et al.2004.MicroRNA genes are transcribed by RNA polymerase II.EMBO J 23：4051 4060)。pre-miRNA由運輸蛋白Ran依賴的核轉運因子受體export-5(Exp5)送至核外，在細胞質內由核酸酶RNase III dicer加工為約22bp成熟的miRNA(He L and Hannon G.2004.MicroRNAs：Small RNAs with a big role in the gene regulation.Nature Gnetics 5：522-532)。成熟的miRNAs與一些蛋白構成復合體，miRISC調節基因的表達(Mourelators et al.，2002.miRNPs：a novel class of ribonucleoproteins containing numerous microRNAs.Genes Dev.16(6)：720-728.)。在復合體形成過程中，Dicer剪切產物(約22bp的雙鏈miRNA)變成單鏈，也稱為成熟的miRNA，另一條鏈迅速消失。miRNA可以抑制mRNA的翻譯，或者通過脫腺苷酸，脫帽等促進mRNA降解，RNA processing body(P-body也稱為GW body)可能在mRNA降解過程發揮了作用(BehM-Ansmant J，et al.2006.microRNAs silence gene expression by repressing protein expression and/or by promoting mRNA decay.Cold Spring Harb Symp Quant Biol 71：523-530)