[發明專利]啤酒花短側鏈脂肪酸CoA連接酶CCL2及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 201210071094.2
• 申請日: 2012-03-16
• 公開（公告）號: CN102618509A
• 公開（公告）日: 2012-08-01
• 發明（設計）人: 王國棟;張鳳霞;徐海洋
• 申請（專利權）人: 中國科學院遺傳與發育生物學研究所
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00;C12N15/52;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12P7/22;C12P13/00;C12P19/32
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種蛋白質，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(b)將序列表中序列1的氨基酸殘基序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有脂肪酸CoA連接酶功能的由(a)衍生的蛋白質。

2.編碼權利要求1所述蛋白的基因。

3.根據權利要求2所述的基因，其特征在于：所述基因為如下1)-4)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列2自5’末端第1至1719位核苷酸所示的DNA分子；

2)序列表中序列2所示的DNA分子；

3)在嚴格條件下與1)或2)所述的DNA分子雜交且編碼所述蛋白的DNA分子；

4)與1)或2)所述的DNA分子具有90％以上的同源性且編碼所述蛋白的DNA分子。

4.含有權利要求2或3所述基因的表達盒、重組表達載體、轉基因細胞系或重組菌。

5.如權利要求4所述的重組表達載體，其特征在于：所述重組表達載體為如下(I)或(II)：

(I)將權利要求2或3所述基因插入pESC-Leu載體的多克隆位點得到的重組質粒；

(II)將權利要求2或3所述基因插入pEXP5-CT/TOPO載體得到的重組質粒。

6.如權利要求4所述的重組菌，其特征在于：所述重組菌為如下(III)或(IV)：

(III)將權利要求5的(I)所述重組質粒和重組質粒pESC-His-VPS導入酵母菌得到的重組菌；所述重組質粒pESC-His-VPS是在pESC-His載體的多克隆位點插入VPS蛋白的編碼基因得到的重組質粒；所述VPS蛋白為序列表的序列3所示的蛋白質；

(IV)將權利要求5的(II)所述重組質粒導入大腸桿菌得到的重組菌。

7.權利要求6的(III)所述重組菌在生產異戊酰基間苯三酚和/或苦味酸中的應用。

8.一種生產權利要求1所述蛋白質的方法，是培養權利要求6的(IV)所述重組菌，得到權利要求1所述蛋白質。

9.權利要求1所述蛋白質作為脂肪酸CoA連接酶的應用。

10.權利要求1所述蛋白質在以異戊酸和輔酶A為原料制備異戊酸輔酶A中的應用。