[發明專利]紅芪總黃酮及總皂苷的提取分離方法

有效

• 申請號: 201210070292.7
• 申請日: 2012-03-16
• 公開（公告）號: CN102579557A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 李金田;景明;李娟;張毅;劉永琦;劉光煒;蘇韞;李雪燕;藺興遙
• 申請（專利權）人: 甘肅中醫學院
• 主分類號: A61K36/48
• 分類號: A61K36/48;A61P1/14;A61P9/10;A61P17/02
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司 11249
• 代理人: 陸菊華

技術領域

????本發明屬于中藥提取領域，具體涉及紅芪總黃酮及總皂苷的提取分離方法。

背景技術

紅芪為豆科植物多序巖黃芪（Hedysarum?polybotrys?Hand.-Mazz.）的干燥根。是一味重要的中藥藥材，其具有補氣升陽，固表止汗，利水消腫。生津養血，行滯通痹，托毒排膿，斂瘡生肌功能，用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，內熱消渴，血虛萎黃，半身不遂，痹痛麻木，癰疽難潰，血虛萎黃，久潰不斂。

由于中藥藥材中所含成分十分復雜，對中藥藥材中有效成分的有效提取和分離成為現代中藥研究的關鍵與前提。

發明內容

本發明的目的是提供從紅芪中提取分離出總黃酮和總皂苷的方法。

本發明實現上述目的的技術方案如下，

紅芪總黃酮及總皂苷的提取分離方法，具體步驟依次如下：

（1）將紅芪和體積濃度為10%～95%的乙醇置于回流裝置中，進行加熱回流，得到提取液；

（2）提取液經過濾除渣后，再減壓蒸餾回收乙醇至無醇味，得到濃縮液；

（3）將濃縮液用水稀釋，稀釋液過聚酰胺柱后，再依次用水、體積濃度為10%～95%的乙醇洗脫聚酰胺柱，洗脫液先減壓蒸餾回收乙醇，接著用乙酸乙酯萃取，再減壓蒸餾回收萃取液中的乙酸乙酯后，得到總黃酮；

（4）收集步驟（3）中稀釋液過聚酰胺柱時的流出液，流出液再用D-101大孔樹脂進行吸附處理，然后依次用水、體積濃度為10%～95%的乙醇洗脫D-101大孔樹脂，洗脫液先減壓蒸餾回收乙醇，接著用正丁醇萃取，再減壓蒸餾回收萃取液中的正丁醇后，得到總皂苷。

有益效果：本發明采用醇提法及柱分離法從紅芪中成功提取分離出總黃酮和總皂苷，每公斤藥材可提取出20.3克的紅芪總黃酮和17.1克的紅芪總皂苷，該方法簡單易行、污染少，所用試劑可回收再利用。

具體實施方式

以下結合實施例對本發明作進一步說明。

實施例1?紅芪總黃酮提取分離

取紅芪藥材，潤濕后切制成厚度為2～3mm的飲片，晾干，稱取6.5?kg，加入70%乙醇，加熱回流提取3次，每次1h，第一次加8倍量的乙醇，后兩次加6倍量乙醇，合并三次提取液，濾過，濾液靜置24?h，濾去沉淀，濾液減壓蒸餾回收乙醇至無醇味，放冷，用蒸餾水稀釋至1:1，然后上聚酰胺（購自河北滄州寶恩化工有限公司）柱，上柱液濃度：1g/ml，上柱速度：2BV/h，然后水洗，接著用70%乙醇洗，洗脫液減壓蒸餾回收乙醇后，用等體積的乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，減壓蒸餾回收乙酸乙酯，殘留物干燥，得131.95g產物1。

產物1的鑒別：稱取0.1g的產物1，置于圓底燒瓶中，加入甲醇10?mL，超聲處理30min，濾過，濾液濃縮至1?mL，作為供試品溶液。另取紅芪對照藥材1g，加入甲醇10?mL，超聲處理30min，濾過，濾液濃縮至1?mL，作為對照藥材溶液。吸取對照藥材溶液、供試品溶液各5???L，分別點于同一硅膠GF₂₅₄薄層板上，以二氯甲烷-丙酮（15:1?v/v）為展開劑，展開，取出晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視，確定產物1為紅芪總黃酮。

產物1中紅芪總黃酮含量測定

蘆丁對照品溶液的制備：精密稱取105℃下干燥至恒重的蘆丁對照品50?mg，置于干燥的25?mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取10ml，置于100ml容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得（每1ml含無水蘆丁0.2mg）備用。實配濃度為0.2198mg/ml。

蘆丁標準曲線的繪制：精密量取上述蘆丁對照品溶液0、1、2、3、4?、6、8mL，分別至25mL容量瓶中，各加水至8ml，分別加人5%亞硝酸鈉溶液1mL，搖勻放置6分鐘，加人10%硝酸鋁溶液1mL，放置6分鐘,?加人1N（4%）氫氧化鈉溶液10mL，再加水至刻度，放置15分鐘，置比色皿中，在波長500nm處測定吸光度。數據經回歸處理得回歸方程為：A=11.66035C+0.0062，r2=0.99839。

精密度試驗：精密吸取紅芪總黃酮樣品溶液，測定吸光度，以吸光度計算，紅芪總黃酮RSD為2.52%。

穩定性試驗：取紅芪總黃酮樣品溶液，每15分鐘測一次吸光度，連續2h考察其穩定性，結果表明2h內顯色均穩定，可進行含量測定。