[發明專利]一種手性β-羥基酯類化合物的酶催化合成方法

有效

• 申請號: 201210070084.7
• 申請日: 2012-03-16
• 公開（公告）號: CN102634546A
• 公開（公告）日: 2012-08-15
• 發明（設計）人: 朱惠霖;李斌;鞠鑫;王海艷
• 申請（專利權）人: 蘇州漢酶生物技術有限公司
• 主分類號: C12P7/62
• 分類號: C12P7/62
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 孫仿衛;汪青

技術領域

本發明屬于化學合成領域，具體涉及一種手性β-羥基酯類化合物的酶催化合成方法。?

背景技術

手性β-羥基酯類化合物的一項重要用途是作為合成藥物奧利司他（Orlistat）的中間體。奧利司他是一種脂肪酶抑制劑。它在膽汁鹽的參與下，與胃腸道脂肪酶形成無活性的中間體，對酶產生不可逆抑制，從而削弱脂肪的消化和吸收，使腸道內長期處于油相狀態，使膽固醇隔離出來并經糞便排泄，從而減少熱量攝入，控制體重。奧利司他（Orlistat）以其獨特的生物活性被各國研究者廣泛的研究，并于1999年6月被批準上市。

瑞士的弗·哈弗曼-拉羅切有限公司在中國申請的一項專利中公開了制備奧利司他中間體的合成路線（專利申請號01111916.0）。具體做法是：先將5,6-二氫吡喃-2-酮氫化還原，然后將生成的手性δ-內酯在堿性條件下進行開環反應并分離，得到β-羥基酯類的奧利司他中間體。開環反應時，還需要用手性試劑（PG）與5位羥基反應，將5位羥基保護起來，同時使得β-羥基具有手性。如該專利中所描述的，這種利用化學合成方法合成手性β-羥基酯化合物的方法在產業上并不實用和經濟，原因是：1）合成路線長，使β-羥基酯的生產成本高；2）控制5位羥基的手性試劑比較昂貴，導致這種合成路線的實用價值較低。因此，開發一種高效、低成本且易于產業化生產的手性β-羥基酯化合物的合成方法是十分有必要的。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服現有技術的不足，提供一種手性β-羥基酯類化合物的酶催化合成方法。

為解決以上技術問題，本發明采取如下技術方案：

一種手性β-羥基酯類化合物的酶催化合成方法，合成路線和步驟如下：

1）、使化合物(i)與化合物(ii)在0℃~室溫、吡啶做縛酸劑的條件下反應，所得產物經萃取濃縮后再在R₂OH中回流，然后重結晶得化合物(iii)；

2）、將化合物(iii)、酮還原酶以及輔酶一起加入pH=6~8的磷酸緩沖液中，15~40℃下反應2~24小時，得到所述手性β-羥基酯類化合物(iv)；其中，按質量計，酮還原酶在反應體系中的加入量與化合物(iii)的加入量的比為1~10:1；所述輔酶為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）或煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）。

優選地，所述化合物(i)至化合物(iv)中的R₁和R₂各自獨立地選自烷基或芳基。

進一步地，所述化合物(i)至化合物(iv)中的R₁選自碳原子3~15之間的飽和烷基，R₂選自碳原子在1~6之間的飽和烷基。

本發明的一個具體實施方式是，所述化合物(i)至化合物(iv)中的R₁選自C₁₁H₂₃-，R₂選自CH₃-。

優選地，步驟2）的反應體系中還加入了用于輔酶再生的輔酶再生系統，所述輔酶再生系統選自如下幾種輔酶再生系統中的一種：①葡萄糖和葡萄糖脫氫酶、②異丙醇、③甲酸銨和甲酸銨脫氫酶。

優選地，步驟2）中還加入了助溶劑，所述助溶劑選自二甲亞砜、乙二醇、聚乙二醇400（即PEG400）和甘油中的一種或多種的混合物。

由于以上技術方案的實施，本發明與現有技術相比具有如下優點：

本發明采用酶催化合成方法制得手性β-羥基酯類化合物，無需使用昂貴的手性試劑，具有生產工藝條件溫和、原料易得、轉化率高、生產成本低等諸多優點，因此具有很高的實用價值。

具體實施方式

下面結合具體的實施例對本發明做進一步詳細的說明，但不限于這些實施例。

本發明的一種具體實施方式是用酶催化合成方法制備出一種用于合成奧利司他的中間體(S)-3-羥基十四碳酸甲酯，具體步驟如下：?