[發明專利]一種人工合成的肉桂醛完全抗原及其應用無效
| 申請號: | 201210067930.X | 申請日: | 2012-03-15 |
| 公開(公告)號: | CN102584984A | 公開(公告)日: | 2012-07-18 |
| 發明(設計)人: | 孫秀蘭;田秀梅;余雯靜;鄭利;錢和;張銀志 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C07K14/765 | 分類號: | C07K14/765;C07K16/06 |
| 代理公司: | 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335 | 代理人: | 王秀麗 |
| 地址: | 214122 江*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 人工合成 肉桂 完全 抗原 及其 應用 | ||
1.一種人工合成的肉桂醛完全抗原,其特征在于以肉桂酸為半抗原,通過活潑酯法與牛血清白蛋白合成免疫原。
2.如權利要求1所述的肉桂醛完全抗原,其特征在于其制備方法如下:
1)合成活潑酯:稱取5mg肉桂酸CA、7mg?N-羥基琥珀酰亞胺NHS,5.8mg碳二亞胺鹽酸鹽EDC.HCL,將其溶于1ml的N,N-二甲基甲酰胺DMF中,40℃下磁力攪拌過夜;
2)合成偶聯物:將21mgBSA溶于2ml磷酸鹽緩沖液PBS中,在磁力攪拌的情況下緩慢添加步驟1制備的混合液,4℃攪拌過夜;反應完成后將反應液在4℃PBS透析72h,每隔6h換一次透析液,之后分裝冷凍干燥后-21℃保存。
3.如權利要求1所述的肉桂醛完全抗原,其特征在所述免疫原的表征方法如下:
1)紫外光譜鑒定:將CA-BSA、BSA、CA配制成濃度為0.5mg/ml,在200-500nm下檢測;
2)紅外光譜鑒定:稱取、CA-BSA、BSA、CA各1mg分別與50mg的溴化鉀研磨混合,采用溴化鉀壓片法進行測定;
3)熒光光譜鑒定;將CA-BSA,BSA的濃度配成0.5mg/ml,激發波長285nm,掃描范圍為300nm-500nm,狹縫寬度為EX=5.0nm,EM=2.5nm,掃描速度3000nm/min條件下掃描;
4)圓二色譜鑒定:將CA-BSA,BSA濃度均配成0.2mg/ml,在波長為190nm到250nm,光程為0.1cm,掃描速度5s/nm條件下進行測定。
4.權利要求1所述的肉桂醛完全抗原應用于人工抗體的制備。
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