[發明專利]適用于巖青蘭總黃酮及其制劑的質量控制方法

無效

• 申請號: 201210067444.8
• 申請日: 2012-03-15
• 公開（公告）號: CN103308643A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 何茂群;李偉;焦啟揚;仝加;靳晶;安飛;楊文寧
• 申請（專利權）人: 瑞陽制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/02;G01N21/33
• 代理公司: 青島發思特專利商標代理有限公司 37212
• 代理人: 馬俊榮

技術領域

本發明涉及一種適用于巖青蘭總黃酮及其制劑的質量控制方法，屬于中藥提取物制劑的質量控制方法領域。?

背景技術

巖青蘭總黃酮是從唇形科植物巖青蘭（Dracocephalum?rupestra?Hance）的干燥地上全草中提取、分離得到的有效部位，其主要成分為二氫黃酮類化合物北美圣草素-7-O-葡萄糖苷和柚皮素-7-O-葡萄糖苷，試驗證明該有效部位可擴張冠脈，顯著增加冠脈流量；具有顯著的PAF拮抗作用，對于PAF誘導的血小板聚集有明顯抑制作用，具有抗氧化、清除自由基和抗蛋白質糖化作用，可治療缺血性心腦血管疾病、心絞痛、心肌梗塞、腦梗塞。現有技術中，尚未有巖青蘭總黃酮原料和制劑的質量控制方法的研究報道。?

發明內容

根據現有技術的不足，本發明要解決的技術問題是：提供一種適用于巖青蘭總黃酮及其制劑的質量控制方法，以便能夠準確快速的反映原料和制劑中北美圣草素素-7-O-葡萄糖苷、柚皮素-7-O-葡萄糖苷及總黃酮的含量，從而有效的控制原料與制劑的質量。?

本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：提供一種適用于巖青蘭總黃酮及其制劑的質量控制方法，主要包括鑒別、含量測定、指紋圖譜項目，其特征在于：它是將北美圣草素素-7-O-葡萄糖苷、柚皮素-7-O-葡萄糖苷做為該中藥原料藥與制劑的質量控制的檢測指標；?

所述的鑒別方法包括薄層色譜法，使用硅膠G、硅膠GF254或硅膠H為薄層板，配制每1ml含0.1~20mg的供試品和對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各0.5~30μl，分別點于同一薄層板上，以展開劑展開8~17cm，取出，晾干，噴以顯色劑，顯色，供試品色譜中，在與對照品相應的位置上，顯相同的斑點；?

所述的鑒別方法還包括化學鑒別法，其操作方法如下：（1）配制每1ml含巖青蘭總黃酮或其固體制劑0.01~100mg的溶液，，置于試管中，加入1~300mg鎂粉或者鋅粉振搖，滴加1~3ml濃鹽酸，1~2分鐘內顯橙紅~紫紅色；（2）配制每1ml含巖青蘭總黃酮或其固體制劑0.01~100mg的溶液，，置于試管中，再加等量的質量分數為2%的NaBH₄的甲醇溶液，一分鐘后加濃鹽酸或濃硫酸1~3ml，變成紫色~紫紅色；?

所述的含量測定方法包括高效液相色譜法，使用C8或C18類型填料的色譜柱，以含有弱酸性溶液的有機溶劑或者含水的有機溶劑為流動相；檢測波長：200~400nm，流速：1ml/min，理論板數≥3000，配制每1ml含北美圣草素-7-O-葡萄糖苷或柚皮素-7-O-葡萄糖苷對照品?0.01~20mg的對照品溶液，再配制每1ml含巖青蘭總黃酮或其固體制劑0.02~20mg的供試品溶液，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液2~100μl，注入液相色譜儀，測定，計算，即得；?

所述的含量測定方法還包括紫外-可見分光光度法，樣品前處理為直接取樣，配制成每1ml含巖青蘭總黃酮或其固體制劑0.01~0.05mg的供試品溶液，測定波長為200~400nm，對照品為北美圣草素-7-O-葡萄糖苷或柚皮素-7-O-葡萄糖苷，采用標準曲線法測定；?

所述的指紋圖譜：采用高效液相色譜法，使用C18或C8類型色譜柱，以甲醇、乙腈、異丙醇、四氫呋喃、水、質量分數為0.1~0.5%的甲酸、乙酸溶液或質量分數為0.1~0.5%的磷酸溶液中的至少一種溶液為流動相，以梯度或等度洗脫的方法分離，檢測波長200~400nm范圍內，以北美圣草素-7-O-葡萄糖苷、柚皮素-7-O-葡萄糖苷二者或其中一者作為特征指紋峰或內標物峰，巖青蘭總黃酮及其制劑以及二者指紋圖譜的峰形和整體特征相關性較好，相似度大于0.95。?

所述的展開劑為石油醚、丙酮、氯仿、甲醇、甲酸、乙酸、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇和水中的兩種或三種配制而成。?

所述的顯色劑為質量分數為1％三氯化鋁乙醇溶液、質量分數為10%硫酸乙醇溶液、質量分數為1％三氯化鐵乙醇溶液或質量分數為5%香草醛濃硫酸溶液；顯色方法為：噴以顯色劑后置紫外燈波長為365nm下視檢，或者105℃加熱至斑點顯色清晰。?

所述的流動相的有機溶劑為乙腈、低級醇或乙腈與低級醇任意比例的混合溶液；所述的低級醇包括甲醇和異丙醇。?

所述的流動相的酸性溶液包括磷酸溶液、甲酸溶液、乙酸溶液或者三氟乙酸溶液。?

所述的流動相中有機溶劑與水或者酸性溶液的體積比為5~50：95~50。?

所述的制劑包括片劑、膠囊劑、滴丸劑、軟膠囊劑、顆粒劑、凍干粉針劑、口服液、注射液和注射乳液。?