[發明專利]利用海洋紅樹林內生真菌生產抗癌蒽醌類化合物的培養基及制備方法

有效

• 申請號: 201210067014.6
• 申請日: 2012-03-14
• 公開（公告）號: CN102586355A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 周祥山;周衛強;蔡孟浩;張元興
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C12P15/00
• 分類號: C12P15/00;C12R1/645
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

技術領域

本發明涉及微生物學領域；更具體地，涉及利用海洋紅樹林內生真菌生產抗癌蒽醌類化合物的培養基及制備方法。?

背景技術

21世紀是一個海洋大開發的時代，越來越多的沿海國家把開發海洋資源的能力作為當前評估國家綜合實力的砝碼。獨特的海洋環境造就了各種各樣的生態系統，被譽為“海上森林”的紅樹林就是其中之一。紅樹林生長在熱帶、亞熱帶海岸的潮間帶，其生活環境具有強還原性、強酸性、高含鹽量和營養豐富等特點。紅樹林具有豐富的真菌資源，目前已分離鑒定的紅樹林真菌超過200種，海洋真菌可以產生眾多種類的天然活性化合物。?

海洋紅樹林內生真菌No.1403屬于層出鐮刀菌(Fusarium?proliferatum)，鹽生堅座殼種(Halorosellinia?sp.)，由香港城市大學L.L.P.Vrijmoed教授從紅樹林樹葉內部分離得到。紅樹林內生真菌No.1403經液體或固體發酵可產生20多種代謝物，包括蒽醌類(Anthraquinone)、萘醌類(Naphthoquinone)和咕噸酮類(Xanthone)等天然物質。1403C是其產生的一種蒽醌類次級代謝物，1403C也叫做SZ-685C，1403C純品為紅色顆粒狀結晶，1403C及其乙?；a物具有顯著的抗腫瘤活性，通過Akt/FOXO途徑誘導癌細胞凋亡，是一種具有較好前景的抗癌候選藥物。?

然而，1403C在初始環境下的得率相當低，目前已經成為制約1403C用于臨床前研究的瓶頸。因此通過優化其培養環境、改善其發酵工藝已成為當務之急。培養基是微生物生長的基質，本領域迫切需要借助各種優化手段，尋求利用海洋紅樹林內生真菌No.1403高效生產抗癌蒽醌類化合物1403C的培養基。?

發明內容

本發明的目的在于提供利用海洋紅樹林內生真菌生產抗癌蒽醌類化合物?的培養基。?

本發明的另一目的在于提供利用海洋紅樹林內生真菌生產抗癌蒽醌類化合物的方法。?

在本發明的第一方面，提供一種發酵培養基，所述培養基含有：?

(1)葡萄糖????????????7-20g/L；?

(2)蛋白胨????????????0.5-2g/L；?

(3)牛肉浸膏??????????2-8g/L；?

(4)一水硫酸錳????????0.1-0.5g/L；?

(1)-(4)的組分溶于10-60％(v/v)濃度的人工海水中。?

在一個優選例中，所述培養基含有：?

(1)葡萄糖????????????9-15g/L；?

(2)蛋白胨????????????0.9-1.6g/L；?

(3)牛肉浸膏??????????3-7g/L；?

(4)一水硫酸錳????????0.2-0.4g/L。?

在另一優選例中，所述的培養基含有：?

(1)葡萄糖????????????11-13g/L；?

(2)蛋白胨????????????0.95-1.2g/L；?

(3)牛肉浸膏??????????5.5-6.5g/L；?

(4)一水硫酸錳????????0.2-0.3g/L。?

在另一優選例中，所述的培養基含有：?

(1)葡萄糖????????????12.36g/L；?

(2)蛋白胨????????????1.05g/L；?

(3)牛肉浸膏??????????6.08g/L；?

(4)一水硫酸錳????????0.246g/L。?

在另一優選例中，所述的培養基中，(1)-(4)的組分溶于30-50％(v/v)濃度的人工海水中；更佳地，(1)-(4)的組分溶于40％(v/v)濃度的人工海水中。?

在另一優選例中，所述的人工海水含有：?

(a)氯化鈉????????????15-25g/L；?

(b)無水硫酸鈉????????3-7g/L；?

(c)無水氯化鈣????????1-2g/L；?

(d)六水氯化鎂????????4-8g/L；?

(e)硼酸??????????????0.02-0.04g/L；?

(f)溴化鉀????????????0.06-0.1g/L；?

(g)碳酸氫鈉??????????0.1-0.2g/L；?

(a)-(g)的組分溶于水(較佳地為去離子水)中。?

在另一優選例中，所述的人工海水含有：?