[發(fā)明專(zhuān)利]一種降解發(fā)酵藥渣中殘余林可霉素的酵母菌及其應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210066252.5
• 申請(qǐng)日: 2012-03-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102676407A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-09-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 牛秋紅;和晶亮;唐悅;沈艷麗;張林;丁鋒;張清會(huì)
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南陽(yáng)師范學(xué)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/16
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/16;A62D3/02;C12R1/645;A62D101/28
• 代理公司: 鄭州紅元帥專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 41117
• 代理人: 季發(fā)軍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物菌株處理藥物廢渣、飼料蛋白技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及到一種降解發(fā)酵藥渣中殘余林可霉素的酵母菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

“超級(jí)細(xì)菌”是細(xì)菌和抗生素博弈的產(chǎn)物，抗生素在殺死細(xì)菌的同時(shí)，也讓一部分未死的細(xì)菌不斷進(jìn)化，產(chǎn)生了耐藥性，抗生素使用越多，細(xì)菌耐藥性也越強(qiáng)。據(jù)調(diào)查，我國(guó)60％的病人使用抗生素都是自作主張，只有少數(shù)會(huì)向醫(yī)生尋求幫助。研究表明，抗生素?cái)z入后除少部分殘留在體內(nèi)，85％以上以原藥和代謝產(chǎn)物的形式經(jīng)由病人與動(dòng)物的糞尿排出體外，其殘留的抗生素進(jìn)入土壤、水域等環(huán)境中，在雨水、風(fēng)等攜帶或促進(jìn)下，進(jìn)而污染地下水、地表水和人們的生活用水。近年來(lái)，在人們生活用水中檢測(cè)到抗生素的報(bào)道越來(lái)越多。可見(jiàn)，這些殘余的抗生素進(jìn)入生態(tài)環(huán)境，破壞了環(huán)境的微生態(tài)平衡。因此，控制抗生素的濫用比研制殺滅?“超級(jí)細(xì)菌”的抗生素更為重要和緊迫。

林可霉素類(lèi)藥物是由鏈霉菌產(chǎn)生的林可酰胺類(lèi)抗生素，屬于目前結(jié)構(gòu)最穩(wěn)定的抗生素之一。它的作用機(jī)理是通過(guò)與核糖體的大亞基結(jié)合，抑制蛋白質(zhì)合成，對(duì)大多數(shù)革蘭陽(yáng)性菌和某些厭氧的革蘭陰性菌有抗菌作用。但是在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)林可霉素過(guò)程中，由于存在提煉純度低等問(wèn)題，造成廢渣中殘留林可霉素含量高，難降解等諸多問(wèn)題，造成嚴(yán)重環(huán)境污染，難以達(dá)到直接利用或排放標(biāo)準(zhǔn)。因此，將林克鏈霉菌發(fā)酵藥渣中殘余的高濃度的林可霉素進(jìn)行生物降解，是將廢渣有效實(shí)現(xiàn)廢物利用的關(guān)鍵步驟，目前備受關(guān)注。作為單細(xì)胞真核微生物的酵母菌菌體蛋白質(zhì)含量高，富含多種維生素，能夠用作飼料，可利用工廠排出的有機(jī)廢料、廢水生長(zhǎng)繁殖。利用酵母菌降解廢渣中高濃度的林可霉素，這不僅變廢為寶，還能解決環(huán)境污染問(wèn)題，可謂一舉兩得。同時(shí)，在微生物家族中，酵母菌是食品、飼料等工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)最成熟的種類(lèi)，研究開(kāi)發(fā)酵母菌藥渣飼料有著重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)不足，提供一種可以有效降解林克鏈霉菌發(fā)酵藥渣中殘余林可霉素含量的酵母菌，使用該酵母菌可以開(kāi)發(fā)酵母菌源生物飼料。

本發(fā)明所述的酵母菌株，為半乳糖霉?(Galactomyces?geotrichum)?S9菌株。

上述半乳糖霉S9菌株已于2012年3月5日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（簡(jiǎn)稱(chēng)CCTCC，地址：武漢市珞珈山武漢大學(xué)），保藏登記入冊(cè)編號(hào)CCTCC?M?2012056。

上述半乳糖霉S9菌株在平板上呈現(xiàn)雪花狀，顏色為白色，呈薄層狀，表面比較干燥，四周有絨絲狀物質(zhì)；中間沒(méi)有突起，該菌的生物量特別大，2周即可長(zhǎng)滿(mǎn)整個(gè)平板，菌落直徑約4～5?cm；細(xì)胞體積大小為（1.60～2.36μm）×（1.6～4.9μm）；光學(xué)顯微鏡下觀察S9大多數(shù)細(xì)胞的形態(tài)呈橢圓形、腎形、圓柱形，有些細(xì)胞與其子代細(xì)胞連在一起成為鏈狀細(xì)胞的生殖方式為裂殖。

上述半乳糖霉S9菌株降解林可霉素，源于菌株發(fā)酵液中的某種代謝物質(zhì)成份，主要作用機(jī)理是菌株產(chǎn)生的某種代謝物質(zhì)成份對(duì)林可霉素結(jié)構(gòu)中的某個(gè)關(guān)鍵化學(xué)鍵產(chǎn)生作用，從而使其分解成小分子物質(zhì)。

上述S9菌株系本發(fā)明人在開(kāi)展發(fā)酵藥渣中高濃度林可霉素的生物降解的研究中，從林可霉素生產(chǎn)藥廠的大量廢水廢渣中篩選到的地霉菌屬酵母菌。研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)林可霉素具極高降解活性，通過(guò)多批次降解林可霉素藥物活性試驗(yàn)確定其活性后，委托武漢大學(xué)中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（CCTCC）對(duì)菌株進(jìn)行鑒定，確定為半乳糖霉菌G.?geotrichum。

本發(fā)明半乳糖霉S9菌株是一類(lèi)全新發(fā)現(xiàn)的具有顯著的降解林可霉素的地霉菌酵母菌菌株，其降解功能主要源于發(fā)酵液中的某種代謝物質(zhì)成份，主要作用機(jī)理是菌株產(chǎn)生的某種代謝物質(zhì)對(duì)林可霉素結(jié)構(gòu)中的某個(gè)關(guān)鍵化學(xué)鍵，從而使其分解成小分子物質(zhì)。同時(shí)半乳糖霉S9菌株在本發(fā)明所述的培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)迅速，容易進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)，具備了很好的應(yīng)用開(kāi)發(fā)前景，本發(fā)明利用半乳糖霉S9菌株處理林克鏈霉菌發(fā)酵藥渣具有高效性和實(shí)用性。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步地說(shuō)明：

圖1是本發(fā)明實(shí)施例中林可霉素濃度與抑菌圈直徑線性關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

具體實(shí)施方式

下面實(shí)施例中，如果沒(méi)有特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法；百分含量如果沒(méi)有特殊說(shuō)明，均為質(zhì)量百分含量。

擴(kuò)大培養(yǎng)半乳糖霉（G.?geotrichum）S9菌株：

制備菌液，將菌液接入含林可霉素的藥渣和稻殼固態(tài)培養(yǎng)基中，提取林可霉素藥物，進(jìn)行降解活性試驗(yàn)，確定其對(duì)林可霉素的降解作用。

半乳糖霉S9菌株的培養(yǎng)方法（以下為重量百分比）：