[發明專利]一株用于堿性果膠酶生產的工程菌及其應用有效
| 申請號: | 201210064448.0 | 申請日: | 2012-03-13 |
| 公開(公告)號: | CN102586158A | 公開(公告)日: | 2012-07-18 |
| 發明(設計)人: | 宋江寧;李小曼;王輝林;馬延和 | 申請(專利權)人: | 天津工業生物技術研究所 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12N9/26;C12P19/14;C12R1/19 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢 |
| 地址: | 300308 天津*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 堿性 果膠酶 生產 工程 及其 應用 | ||
1.大腸埃希氏菌(Escherichia?coli)BL21(DE3)PGL04,它的保藏編號為CGMCC?No.5697。
2.權利要求1所述大腸埃希氏菌BL21(DE3)PGL04在生產堿性果膠酶中的應用。
3.一種生產堿性果膠酶的方法,包括如下步驟:
(1)將權利要求1所述大腸埃希氏菌BL21(DE3)PGL04接種至發酵培養基,得到OD600nm=0.1-0.2的發酵初始體系;
(2)將發酵初始體系進行如下發酵:先35-37℃振蕩培養3-5小時,然后加入IPTG至終濃度為50-100μM,25-30℃繼續振蕩培養40-48小時,得到堿性果膠酶。
4.如權利要求3所述的方法,其特征在于:所述發酵培養基制備方法如下:取10-15g胰蛋白胨、15-23g酵母提取物、5-10g氯化鈉、10-15g甘油、10-17mM磷酸二氫鉀和65-75mM磷酸氫二鉀,用水溶解并定容至1L。
5.如權利要求3或4所述的方法,其特征在于:所述大腸埃希氏菌BL21(DE3)PGL04以種子液的方式接種至所述發酵培養基。
6.如權利要求5所述的方法,其特征在于:所述種子液的制備方法如下:將所述大腸埃希氏菌BL21(DE3)PGL04接種至種子培養基,35-37℃振蕩培養至OD600nm=3-6,即為種子液。
7.如權利要求6所述的方法,其特征在于:所述種子培養基的制備方法如下:取10-15g胰蛋白胨、5-8g酵母提取物和5-10g氯化鈉,用水溶解并定容至1L。
8.權利要求3至7中任一所述方法生產得到的堿性果膠酶。
9.權利要求8所述堿性果膠酶在降解多聚半乳糖醛酸中的應用。
10.權利要求8所述堿性果膠酶在以多聚半乳糖醛酸為底物生產不飽和多聚半乳糖醛酸中的應用。
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