[發(fā)明專(zhuān)利]一種金絲桃素白蛋白納米粒-免疫球蛋白G抗體偶聯(lián)物及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210063589.0
• 申請(qǐng)日: 2012-03-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102579354A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁劍平;胡小艷;陶蕾;王學(xué)紅;劉宇;尚若峰;赫寶成;華蘭英
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所
• 主分類(lèi)號(hào): A61K9/14
• 分類(lèi)號(hào): A61K9/14;A61K31/122;A61K47/42;A61P37/04;A61P31/12;A61P35/00
• 代理公司: 北京中恒高博知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11249
• 代理人: 高松

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種抗病毒天然藥物，具體地，涉及一種金絲桃素白蛋白納米粒-免疫球蛋白G抗體偶聯(lián)物。

背景技術(shù)

金絲桃素（Hypericin，HY）是從藤黃科（Clusiaceae）植物貫葉連翹（Hypericum?perforatum?Linn.）中提取的萘駢二蒽酮化合物，具有光敏活性和光動(dòng)作用，可應(yīng)用于腫瘤的光化學(xué)診斷和治療。但是由于金絲桃素對(duì)光、熱不穩(wěn)定性，目前市場(chǎng)上金絲桃素有效成分含量極低，遠(yuǎn)遠(yuǎn)達(dá)不到終端產(chǎn)品開(kāi)發(fā)的要求。納米藥物是指以納米級(jí)高分子納米粒(nanoparticles，NP)、納米球?(nanospheres，NS)、納米囊(nanocapsules，NC)等為載體，與藥物以一定方式結(jié)合在一起后制成的藥物，其粒徑可能超過(guò)100?nm，但通常應(yīng)小于500?nm，納米藥物也可以是直接將原料藥物加工制成的納米粒。白蛋白不僅具備以上特點(diǎn)，它還具有免疫原性低的特點(diǎn)。另外，白蛋白中的氨基酸以肽鍵相連接，且扭曲成團(tuán)狀，具網(wǎng)狀空隙，為鑲嵌攜帶藥物創(chuàng)造了有利條件，與脂質(zhì)體和乳劑相比，白蛋白納米粒的體內(nèi)和貯存穩(wěn)定性較好。

因此，以牛血清白蛋白作為載體材料包封天然抗病毒藥物有效成分金絲桃素，得到金絲桃素白蛋白納米粒是一種較好的解決辦法，它不僅提高了金絲桃素的有效含量，同時(shí)改善了其對(duì)光、熱的不穩(wěn)定性，為金絲桃素及類(lèi)似的植物有效成分的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供了一種途徑，另外，由于金絲桃素白蛋白納米粒粒徑小，易于通過(guò)機(jī)體屏障，還具有免疫系統(tǒng)被動(dòng)靶向作用，易于藥物在免疫系統(tǒng)的聚集，這代表了藥物有效成分的一個(gè)發(fā)展趨勢(shì)。以上只是在一定程度上提高了金絲桃素的有效含量，但是，如果進(jìn)一步增強(qiáng)金絲桃素的有效利用率，現(xiàn)有技術(shù)沒(méi)有相關(guān)的記載。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服現(xiàn)有的缺陷，提供了一種金絲桃素白蛋白納米粒-免疫球蛋白G抗體偶聯(lián)物，由于納米制劑本身具有被動(dòng)靶向作用，同時(shí)，免疫球蛋白G抗體具有主動(dòng)靶向作用，可以和機(jī)體的抗原產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，將藥物帶到機(jī)體特定部位，兩者結(jié)合后大大增強(qiáng)了藥物的靶向性，提高了金絲桃素的藥效，同時(shí)，該制備工藝可在室溫下進(jìn)行，工藝簡(jiǎn)單，易于操作，特別適于工業(yè)化生產(chǎn)。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

一種金絲桃素白蛋白納米粒-免疫球蛋白G抗體偶聯(lián)物，通過(guò)以下步驟制備完成：

（1）將金絲桃素白蛋白納米粒與免疫球蛋白G抗體溶于PBS緩沖液；

（2）在步驟（1）所得溶液中加入戊二醛，制得金絲桃素白蛋白納米粒-免疫球蛋白G抗體偶聯(lián)物。

具體地，步驟（1）所述金絲桃素白蛋白納米粒的粒徑為60?nm-150?nm；所述免疫球蛋白G抗體為分子量為150?kDa的牛免疫球蛋白G抗體。

具體地，步驟（1）所述的免疫球蛋白G抗體和金絲桃素白蛋白納米粒質(zhì)量比為1:1-1:15。

具體地，步驟（1）所述PBS緩沖液的PH為7.2；步驟（2）所述戊二醛為質(zhì)量濃度1?%-10%的新鮮戊二醛。

具體地，步驟（2）所述戊二醛的加入條件為400rpm/min-1000?rpm/min攪拌、-10-30℃下緩慢滴加。

本發(fā)明所述金絲桃素白蛋白納米粒-免疫球蛋白G抗體偶聯(lián)物的制備方法，包括以下步驟：

（1）將金絲桃素白蛋白納米粒與免疫球蛋白G抗體溶于PBS緩沖液；

（2）在步驟（1）所得溶液中加入戊二醛，制得金絲桃素白蛋白納米粒-免疫球蛋白G抗體偶聯(lián)物。

具體地，步驟（1）所述金絲桃素白蛋白納米粒的粒徑為60?nm-150?nm；所述免疫球蛋白G抗體為分子量為150?k?Da的牛免疫球蛋白G抗體。

具體地，步驟（1）所述的金絲桃素白蛋白納米粒與免疫球蛋白G抗體的質(zhì)量比為1:1-1:15。

具體地，步驟（1）所述PBS緩沖液的PH為7.2；步驟（2）所述戊二醛為質(zhì)量濃度1?%-10%的新鮮戊二醛。

具體地，步驟（2）所述戊二醛的加入條件為400rpm/min-1000?rpm/min攪拌、-10-30℃下緩慢滴加。

所述金絲桃素白蛋白納米粒制備工藝如下：?