[發明專利]一種檢測結核易感性的檢測標靶、引物及試劑

有效

• 申請號: 201210060910.X
• 申請日: 2012-03-09
• 公開（公告）號: CN103305594A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 戈寶學;鄭瑞娟;唐神結;劉海鵬;陳家霞
• 申請（專利權）人: 上海市肺科醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 竺路玲

技術領域

本發明涉及一種用于檢測結核易感性的檢測標靶、引物和試劑，尤其涉及一種通過檢測基因位點多態性來判定人體對結核病易感性的引物、以及包括所述引物的試劑和試劑盒。

背景技術

結核病是由結核分枝桿菌引起的慢性傳染病，是一種常見的可致命的傳染病。結核分枝桿菌可侵及許多臟器，以肺部受累形成肺結核最為常見。

人體感染結核菌后不一定發病，當抵抗力降低或細胞介導的變態反應增高時，才可能引起臨床發病。認為全球約有1/3的人感染了結核分支桿菌，但大多數受感染者沒有病癥，成為潛伏結核感染，其中5~10%的潛伏感染者會發展成為活動性結核，若無適當治療，一個活動病例平均每年可使10-15人新受感染。

1921年卡脈特與介嵐發明了卡介苗（BCG），用來預防肺結核，但其成效在近些年來倍受質疑；1944年發明的鏈霉素（Streptomycin），是第一個有效的抗結核藥物。雖然新的抗結核藥物陸續被發展出來，但目前結核的高耐藥率使得結核病仍然是棘手的公共衛生問題。為此，世界衛生組織制定了新的六點控制結核的戰略，該戰略支持開發有效預防、發現和治療結核的新工具。

有觀點認為潛伏感染者發病可能是與宿主免疫應答相關的免疫基因發生了變異。新加坡科學家發現了一個與結核病易感性有關的基因——TLR8基因，并且發現男性比女性更易感染結核病，識別TLR8在結核病易感性中的作用，為科學家和臨床醫學家提供了一個干預治療的新靶點。

不過復旦大學醫學分子病毒重點實驗室的高謙研究員認為，“基因與肺結核易感性的聯系還需要更多的研究結果來確認”。

發明內容

由于目前關于易感性檢測的方法并不多見，尋找新的、有效的結核易感性的檢測方法對于結核病的預防具有重要的意義，針對這一問題，本發明提供了一種用于檢測結核易感性的引物、以及包括所述引物的試劑和試劑盒。

本發明的第一個方面是提供一種用于檢測結核病易感性的檢測標靶，包括EBI3基因、NOTCH4基因、BTLA基因中的任意一個或多個。

本發明的第二個方面是提供一種用于檢測結核病易感性的引物，所述引物以EBI3基因上rs4740號SNP位點、NOTCH4基因rs116185472號SNP位點、BTLA基因rs1982809號SNP位點中的任意一個或多個SNP位點為檢測標靶，根據包括所述位點、并且端點距所述SNP位點1~1000bp范圍內的序列進行設計，所設計引物長度為18~30bp之間，并能夠測定EBI3基因、NOTCH4基因、BTLA基因中的一個或多個基因的基因型。

根據本發明的用于檢測結核病易感性的引物的一種優選實施方式，所述引物包括以EBI3基因上rs4740號SNP位點、NOTCH4基因rs116185472號SNP位點、和BTLA基因rs1982809號SNP位點為檢測標靶進行設計的引物，所述引物分別能夠測定EBI3基因rs4740號SNP位點、NOTCH4基因rs116185472號SNP位點、BTLA基因rs1982809號SNP位點的基因型。

本發明第三個方面是提供一種用于檢測結核病易感性的試劑，包括以EBI3基因上rs4740號SNP位點、NOTCH4基因rs116185472號SNP位點、BTLA基因rs1982809號SNP位點中的任意一個或多個位點為檢測標靶，根據包括所述位點、并且端點距所述SNP位點1~1000bp范圍內的序列進行設計的引物，所設計引物長度為18~30bp之間，并能夠測定EBI3基因、NOTCH4基因、BTLA基因中的一個或多個基因的基因型。

根據本發明的用于檢測結核病易感性的試劑的一種優選實施方式，所述引物包括以EBI3基因上rs4740號SNP位點、NOTCH4基因rs116185472號SNP位點、和BTLA基因rs1982809號SNP位點為檢測標靶進行設計的引物，所述引物分別能夠測定EBI3基因rs4740號SNP位點、NOTCH4基因rs116185472號SNP位點、BTLA基因rs1982809號SNP位點的基因型。

其中，所述用于檢測結核病易感性的試劑還可以包括測序引物。