[發(fā)明專利]一種釀酒酵母及其補料分批發(fā)酵生產S-腺苷甲硫氨酸的工藝

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210060775.9
• 申請日: 2012-03-09
• 公開（公告）號: CN102676409A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發(fā)明（設計）人: 楊文革;胡永紅;唐容容
• 申請（專利權）人: 南京工業(yè)大學
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;C12P19/40;C12R1/865
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;袁正英

1.一種酵母，其分類命名為釀酒酵母，菌種的拉丁學名是Saccharomyces?cerevisiae，參據(jù)的微生物為：NJYHWG?71082，保藏日期是2012年2月27日，保藏中心登記入冊編號是CGMCC?No.5815。

2.一種利用如權利要求1所述的釀酒酵母發(fā)酵生產S-腺苷甲硫氨酸的工藝，其具體步驟如下：將釀酒酵母CGMCC?No.5815接種于固體培養(yǎng)基中，該固體培養(yǎng)基組分為：葡萄糖50～70g/L，酵母浸膏3～8g/L，瓊脂15～20g/L；在28～35℃的條件下培養(yǎng)18～24h；選取一個菌落，挑取菌體，接入裝有種子液的培養(yǎng)基的錐形瓶中瓶培養(yǎng)；種子液培養(yǎng)基組分：葡萄糖：30～50g/L，蛋白胨10～20g/L，酵母浸膏5～8g/L，pH控制在6.0～7.5；調節(jié)轉速120～200rpm，28～35℃培養(yǎng)18～24h得種子液；取發(fā)酵培養(yǎng)基體積5～20％的種子液培養(yǎng)基接入滅菌后裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng)；發(fā)酵培養(yǎng)基組分：葡萄糖：40～80g/L，酵母浸膏2～8g/L，無機鹽0.465～1.73g/L，維生素0.1～0.3g/L，氨基酸1～10g/L，pH保持在6.0～7.5；在發(fā)酵過程中進行補料添加葡萄糖和甲硫氨酸，使葡萄糖濃度保持在50～70g/L，甲硫氨酸濃度保持在6～10g/L；控制溫度、通氣量和轉速，發(fā)酵培養(yǎng)40～60h得發(fā)酵液。

3.根據(jù)權力要求2所述的工藝，其特征在于所述的無機鹽組成為：NaH₂PO₄：0.2～0.8g/L、Na₂HPO₄：0.2～0.8g/L、MgSO₄·7H₂O：0.05～0.1g/L、FeSO₄·7H₂O：0.005～0.01g/L、CaCl₂：0.005～0.01g/L、MnCl₂：0.005～0.01g/L。

4.根據(jù)權力要求2所述的工藝，其特征在于所述的種子液體積裝液量為錐形瓶的10％～30％；其中發(fā)酵罐裝液量為發(fā)酵罐體積的20～50％。

5.根據(jù)權力要求2所述的工藝，其特征在于所述的維生素為硫胺素或鈷胺素。

6.根據(jù)權力要求2所述的工藝，其特征在于發(fā)酵進行6～15h時補料添加葡萄糖，使其濃度8～10h內保持在50～70g/L，流加所用的葡萄糖的濃度為100～200g/L。

7.根據(jù)權力要求2所述的工藝，其特征在于發(fā)酵進行3～5h時，每隔20～40分鐘補料添加甲硫氨酸，使其濃度保持在5～10g/L；發(fā)酵進行到第10～12h時，改成每隔10～20分鐘補料添加甲硫氨酸，使其濃度保持在2～8g/L；流加所用的甲硫氨酸的濃度為80～120g/L，發(fā)酵進行22～32h時停止補料添加。

8.根據(jù)權力要求2所述的工藝，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)過程中通入無菌空氣，通氣量控制在2～5L/(L·min)；溫度控制在28～35℃；轉速控制在120～200rpm。