[發(fā)明專利]適于轉(zhuǎn)化細(xì)胞的載體、重組細(xì)胞及其用途

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210058478.0
• 申請(qǐng)日: 2012-03-07
• 公開（公告）號(hào): CN102851312A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐俊光;李勇;魏霞;趙云;戰(zhàn)麗萍;張立通;王俊;汪建
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳華大基因研究院;深圳華大基因科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/85
• 分類號(hào): C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02;G01N21/31;G01N21/64;G01N21/76;G01N33/68
• 代理公司: 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

1.一組適于轉(zhuǎn)化細(xì)胞的載體，其特征在于，包括：

第一載體，所述第一載體包含：

第一核酸序列，所述第一核酸序列包括編碼報(bào)告蛋白的序列，所述報(bào)告蛋白具有可檢測(cè)的活性；以及

二惡英響應(yīng)區(qū)域，所述二惡英響應(yīng)區(qū)域包含二惡英應(yīng)答元件，并且所述二惡英響應(yīng)區(qū)域與所述第一核酸序列可操作地連接，

第二載體，所述第二載體包含：

第二核酸序列，所述第二核酸序列包含編碼芳香烴受體的序列，

任選地，所述細(xì)胞為小鼠肝癌細(xì)胞，

任選地，所述細(xì)胞為小鼠肝癌細(xì)胞Hepa1-6。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一組適于轉(zhuǎn)化細(xì)胞的載體，其特征在于，所述報(bào)告蛋白為選自發(fā)光蛋白、熒光蛋白、酶的至少一種，

任選地，所述報(bào)告蛋白為綠色熒光蛋白、增強(qiáng)型綠色熒光蛋白以及熒光素酶的至少一種，

任選地，所述報(bào)告蛋白為增強(qiáng)型綠色熒光蛋白，

任選地，所述二惡英響應(yīng)區(qū)域包含多個(gè)串聯(lián)的二惡英應(yīng)答元件，

任選地，所述二惡英應(yīng)答元件具有如SEQ?ID?NO：1-7至少一項(xiàng)所示的核苷酸序列，

任選地，所述二惡英響應(yīng)區(qū)域進(jìn)一步包含第一啟動(dòng)子，所述第一啟動(dòng)子分別與所述二惡英應(yīng)答元件和所述第一核酸序列可操作地相連，

任選地，所述第一啟動(dòng)子為CMV啟動(dòng)子或其功能等同體，

任選地，所述第一啟動(dòng)子具有如SEQ?ID?NO:8所示的核苷酸序列，

任選地，所述第一載體進(jìn)一步包含編碼第一篩選標(biāo)記基因的核酸序列，

任選地，所述第一篩選標(biāo)記基因?yàn)檫x自編碼發(fā)光蛋白的基因和藥物抗性基因的至少一種，

優(yōu)選地，所述藥物抗性基因?yàn)檫x自新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶和潮霉素B抗性基因的至少一種，

任選地，所述第二核酸序列具有如SEQ?ID?NO：9所示的核苷酸序列，

任選地，所述第二載體進(jìn)一步包括第二啟動(dòng)子，所述第二啟動(dòng)子與所述第二核酸序列可操作地連接，

任選地，所述第二啟動(dòng)子為真核細(xì)胞啟動(dòng)子，

任選地，所述真核細(xì)胞啟動(dòng)子為選自CAG啟動(dòng)子和PGK啟動(dòng)子的至少一種，

任選地，所述第二載體進(jìn)一步包含增強(qiáng)子序列，所述增強(qiáng)子序列與所述第二核酸序列可操作地連接，

任選地，所述第二載體進(jìn)一步包含內(nèi)含子序列，所述內(nèi)含子序列與所述第二核酸序列可操作地連接，

任選地，所述第二載體進(jìn)一步包括編碼第二篩選標(biāo)記基因的核酸序列，

任選地，所述第二篩選標(biāo)記基因?yàn)檫x自編碼發(fā)光蛋白的基因和藥物抗性基因的至少一種，

任選地，所述第一篩選標(biāo)記基因與所述第二篩選標(biāo)記基因不同。

3.一種適于轉(zhuǎn)化細(xì)胞的載體，其特征在于，包括：

第一核酸序列，所述第一核酸序列包括編碼報(bào)告蛋白的序列，所述報(bào)告蛋白具有可檢測(cè)的活性；以及

二惡英響應(yīng)區(qū)域，所述二惡英響應(yīng)區(qū)域包含二惡英應(yīng)答元件，并且所述二惡英響應(yīng)區(qū)域與所述第一核酸序列可操作地連接，

任選地，所述細(xì)胞為小鼠肝癌細(xì)胞，

任選地，所述細(xì)胞為小鼠肝癌細(xì)胞Hepa1-6，

任選地，所述報(bào)告蛋白為選自發(fā)光蛋白、熒光蛋白、酶的至少一種，

任選地，所述報(bào)告蛋白為綠色熒光蛋白、增強(qiáng)型綠色熒光蛋白以及熒光素酶的至少一種，

任選地，所述報(bào)告蛋白為增強(qiáng)型綠色熒光蛋白，

任選地，所述二惡英響應(yīng)區(qū)域包含多個(gè)串聯(lián)的二惡英應(yīng)答元件，

任選地，所述二惡英應(yīng)答元件具有如SEQ?ID?NO：1-7至少一項(xiàng)所示的核苷酸序列，

任選地，所述二惡英響應(yīng)區(qū)域進(jìn)一步包含第一啟動(dòng)子，所述第一啟動(dòng)子分別與所述二惡英應(yīng)答元件和所述第一核酸序列可操作地相連，

任選地，所述第一啟動(dòng)子為CMV啟動(dòng)子或其功能等同體，

任選地，所述第一啟動(dòng)子具有如SEQ?ID?NO:8所示的核苷酸序列，

任選地，所述第一載體進(jìn)一步包含編碼第一篩選標(biāo)記基因的核酸序列，

任選地，所述第一篩選標(biāo)記基因?yàn)檫x自編碼發(fā)光蛋白的基因和藥物抗性基因的至少一種，

任選地，所述藥物抗性基因優(yōu)選為選自新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶和潮霉素B抗性基因的至少一種。