[發明專利]基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法

無效

• 申請號: 201210056325.2
• 申請日: 2012-03-06
• 公開（公告）號: CN102586396A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 任信;朱小衛;朱建華
• 申請（專利權）人: 中華人民共和國吳江出入境檢驗檢疫局
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1)制備試樣

將樣品剪成圓形，正反兩面均在紫外下照射30min滅菌；

步驟2)制備2，3，5-氯化三苯基四氮唑固體培養基

用常規培養基配制方法配制固體培養基，按2/100000加入2，3，5-氯化三苯基四氮唑，后塞上棉塞，121℃，滅菌20min；

步驟3)制備2，3，5-氯化三苯基四氮唑半固體培養基

用常規培養基配制方法配制半固體培養基，按2/100000加入2，3，5-氯化三苯基四氮唑，后塞上棉塞，121℃，滅菌20min；

步驟4)制備接種菌懸液

取培養好的菌懸液各0.5ml加入4.5ml滅菌的生理鹽水試管中，即稀釋至10^-1的濃度，充分混勻后取10^-1濃度的菌懸液0.5ml加入另一只4.5ml滅菌的生理鹽水試管中，即稀釋至10^-2的濃度，依次類推，直至稀釋至10^-5的濃度的接種菌懸液；

步驟5)檢測操作

5.1)向已滅好菌的平皿中倒入2，3，5-氯化三苯基四氮唑固體培養基60～80ml，待凝固時，無菌鑷子放入無菌玻璃杯，放入試樣，功能面朝下，用鑷子輕壓試樣，使其緊貼于培養基表面；每樣均做4～6個平行；

5.2)取制備好的接種菌懸液0.1ml加到試樣表面，37℃±1℃培養1h；

5.3)取0.3ml～0.6ml半固體2，3，5-氯化三苯基四氮唑培養基加入試樣表面，將試樣均勻覆蓋，蓋上皿蓋；

5.4)倒置平皿，于生化培養箱中培養，其中，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌37℃±1℃培養18～24h；白色念珠菌28±1℃培養24～48h；

5.5)于體式顯微鏡或顯微鏡下觀察菌落生長情況；

步驟6)評價與報告

試樣抑菌率按下式(1)計算：

Y=Xa-XbXa×100%---(1)]]>

式中：Y為抑菌率，100％；Xa為未經抗菌處理試樣菌落數平均值，單位為cfu；Xb為抗菌處理試樣菌落數平均值，單位為cfu。

2.根據權利要求1所述的基于杯碟法的皮革材料的抑菌效果檢測方法，其特征在于，所述菌懸液的制備方法如下：從保存于4℃冰箱的菌種斜面中取一接種環菌，在平板培養基上劃線，37℃±1℃，培養18～24h；取液體培養基20ml放入100ml三角瓶中；用接種環從已培養18～24h的平皿中挑取一個典型的菌落，接種到液體培養基中，37℃±1℃，130r/m振蕩培養18～20h，即為菌懸液。