[發(fā)明專(zhuān)利]一種促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210056137.X
• 申請(qǐng)日: 2012-03-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102586351A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃和;紀(jì)曉俊;鄧中濤;聶志奎;彭超;叢蕾蕾;黎志勇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12P7/64
• 分類(lèi)號(hào): C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 南京蘇高專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 肖明芳

1.一種促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，將高山被孢霉(Mortierella?alpina)菌種經(jīng)活化培養(yǎng)后，在碳源和其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富的培養(yǎng)基上進(jìn)行菌體快速增殖培養(yǎng)，收集菌體，再在碳源豐富而其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏的培養(yǎng)基上進(jìn)行油脂快速積累培養(yǎng)，收集菌體，最后在缺碳的培養(yǎng)基上進(jìn)行花生四烯酸快速積累培養(yǎng)，收集菌體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，所述的活化培養(yǎng)條件為：將菌種接種在PDA斜面培養(yǎng)基上，20-28℃下培養(yǎng)120-192h，然后再將斜面上的菌絲體接入搖瓶種子活化培養(yǎng)基中，20-28℃、100-250rpm下活化培養(yǎng)18-24h；其中，所述的搖瓶種子活化培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖20-60g/L，酵母膏3-6g/L，KH₂PO₄?2-5g/L，NaNO₃?2-5g/L，MgSO₄·7H₂O?0.3-1.5g/L，溶劑為水。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，所述的碳源和其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富的培養(yǎng)基配方為：葡萄糖40-8Og/L，酵母膏6-15g/L，KH₂PO₄?2-6g/L，NaNO₃?2-6g/L，MgSO₄·7H₂O?0.5-1.5g/L，泛酸鈣0.1-2g/L，維生素0.2-1g/L，溶劑為水。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，所述的菌體快速增殖培養(yǎng)條件為：接種量5％-20％(v/v)，初始pH5.5-7.5，溫度20-28℃，培養(yǎng)48-72h，轉(zhuǎn)速100-250rpm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，所述的碳源豐富而其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏的培養(yǎng)基配方為：葡萄糖濃度20-60g/L，泛酸鈣0.1-1g/L，維生素0.1-1g/L，溶劑為水。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，油脂快速積累培養(yǎng)條件為：pH5-8，溫度20-28℃，培養(yǎng)時(shí)間24-60h，轉(zhuǎn)速100-250rpm。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，所述的缺碳的培養(yǎng)基配方為：酵母膏1-4g/L，KH₂PO₄?0.5-1.5g/L，NaNO₃?0.5-1.5g/L，MgSO₄·7H₂O?0.1-1g/L，泛酸鈣0.2-1g/L，維生素0.1-0.5g/L，溶劑為水；或NaCl?0.9-3g/L，泛酸鈣0.1-1g/L，維生素0.1-1g/L，溶劑為水。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，所述的花生四烯酸快速積累培養(yǎng)條件為：溫度15-25℃，培養(yǎng)時(shí)間12-60h，轉(zhuǎn)速100-250rpm。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的促進(jìn)花生四烯酸油脂高效積累的方法，其特征在于，所述的收集菌體條件為：發(fā)酵液離心后，用無(wú)菌生理鹽水洗滌、離心，重復(fù)洗滌、離心操作1～2次，收集菌體。