[發明專利]Ago2基因及其表達產物的應用

無效

• 申請號: 201210053761.4
• 申請日: 2012-03-02
• 公開（公告）號: CN103290101A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 韓澤廣;程娜;李硯東
• 申請（專利權）人: 上海人類基因組研究中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/68;G01N33/574;A61K48/00;A61K39/395;A61K45/00;A61P35/00;C12N15/11;C12N15/113
• 代理公司: 上海浦一知識產權代理有限公司 31211
• 代理人: 劉昌榮

技術領域

本發明涉及基因治療和診斷技術領域，特別是涉及一種Ago2基因及其表達產物在肝癌的診斷和治療中的應用。

背景技術

肝癌的診斷，尤其是早期診斷，是臨床診療和預后的關鍵?？捎米髟l性肝癌標志物的生物分子，通常認為有以下四類：癌胚和糖蛋白抗原；酶和同工酶；細胞因子；基因。

目前，在我國，對肝癌的定性診斷以檢測血清AFP(甲胎蛋白)為主，診斷依據是：60％以上的肝癌病例，血清AFP濃度大于400μg/L。雖然AFP的敏感性(40％～65％)和特異性(76％～96％)均不令人滿意，但由于目前還沒有其他腫瘤標志物的特異性可與AFP相媲美，且血清AFP的檢測較少依賴影像學設備和新技術，因此，AFP仍然是目前全球范圍內應用最廣泛的肝癌腫瘤標志物。

除AFP外，近年來用于肝癌檢測的其他血清標志物還包括：AFP異質體、γ-谷氨酰轉肽酶同工酶Ⅱ(GGT-Ⅱ)、堿性磷酸酶同工酶Ⅰ、醛縮酶同工酶A(ALD-A)、巖藻糖苷酶(AFU)、抗胰蛋白酶Ⅰ、異常凝血酶原、鐵蛋白與酸性鐵蛋白等。AFP異質體和異常凝血酶原的應用提高了肝癌患者的檢出率，但早期診斷和指導個性化治療的分子分型診斷仍是我們面臨的極大挑戰，而發現靈敏度和特異性更高的新的腫瘤標志物，是提高肝癌早期診斷水平的關鍵。

肝癌的治療在過去20年里取得了很大的進展，出現了一些局部非手術治療方案。例如，經導管動脈內化療栓塞(TACE)，是中晚期肝癌治療的重要手段，可使90％以上的肝癌患者受益；經皮肝穿刺瘤內無水乙醇治療(PEI)，也是常用的局部化療方法，對癌直徑小于3厘米的肝癌及門靜脈癌栓有一定療效。但是，由于目前肝癌的化療藥物基本沿用其他腫瘤的治療藥物，針對性較差，因此，總體療效不佳，迫切需要尋找新的作用靶點，研究和開發肝癌特異的新藥物，以提高化療的特異性和有效性。

Ago2，全稱Argonaute2，又名EIF2C2，真核細胞轉錄起始因子2C2，主要編碼Argonaute家族的蛋白，在RNA干擾中起作用。研究發現，在人類中，Ago2與指導RNA生成的酶Dicer以及RNA結合蛋白TRBP相結合，形成RISC-loading復合物，在該復合物中，Ago2提供RNA酶的作用，對目的mRNA進行剪切，使之形成與相應的siRNA或者miRNA互補的部分，從而完成RNA干擾的效果。此外，人們發現Ago2在miRNA成熟過程中也起著十分重要的作用。然而，有關Ago2基因與癌癥的報道并不多見，特別是Ago2基因與肝癌發生發展的關系，目前未見報導。

發明內容

本發明要解決的技術問題之一是提供一種Ago2基因及其表達產物在制備診斷肝癌的產品中的應用。

本發明要解決的技術問題之二是提供一種Ago2基因及其表達產物在制備治療肝癌的藥物中的應用。

本發明要解決的技術問題之三是提供一對特異擴增Ago2基因的引物，該引物可用于制備用RT-PCR或實時定量PCR診斷肝癌的產品。

本發明要解決的技術問題之四是提供一對Ago2基因的siRNA，該對siRNA可用于制備治療肝癌的藥物。

本發明要解決的技術問題之五是提供Ago2基因的shRNA，該shRNA可用于制備治療肝癌的藥物。

為了解決上述技術問題，本發明通過如下技術方案實現：

在本發明的一方面，提供了一種Ago2基因及其表達產物在制備診斷肝癌的產品中的應用。

所述診斷肝癌的產品包括：用RT-PCR、實時定量PCR、免疫檢測或原位雜交診斷肝癌的產品。

在本發明中，所述用RT-PCR診斷肝癌的產品至少包括一對特異擴增Ago2基因的引物。

所述用實時定量PCR診斷肝癌的產品至少包括一對特異擴增Ago2基因的引物。

所述用免疫檢測診斷肝癌的產品包括：與Ago2蛋白特異性結合的抗體，包括多克隆抗體和單克隆抗體。

所述用原位雜交診斷肝癌的產品包括：與Ago2基因的核酸序列雜交的探針。