[發明專利]一種制備阿卡波糖的方法

有效

• 申請號: 201210053220.1
• 申請日: 2012-03-02
• 公開（公告）號: CN102559814A
• 公開（公告）日: 2012-07-11
• 發明（設計）人: 李小兵;魏青;時偉;陸敏;姚清國
• 申請（專利權）人: 石家莊學院
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26;C12R1/045
• 代理公司: 石家莊新世紀專利商標事務所有限公司 13100
• 代理人: 張素靜

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種制備阿卡波糖的方法。

技術背景

阿卡波糖是有效的葡糖苷酶抑制劑，用作口服治療糖尿病的抗糖尿病藥物，通過游動放線菌（Actinoplanes?utahensis）的發酵培養獲得。阿卡波糖的分子結構如下式，由4個單糖組成，其生物合成主要是糖代謝，發酵培養基中的碳源（糖源）組成十分關鍵。阿卡波糖發酵的最大特點是，生產菌的生產力顯著依賴于培養液的滲透壓濃度（制備阿卡波糖的滲透控制的發酵方法，專利公?開?號：CN1178837，拜爾公司），滲透壓的控制主要通過維持培養液中高濃度底物來實現，糖源就是其中最需要控制的。糖源的質量是發酵水平高低和雜質控制的關鍵，培養液中的糖源主要是復合型麥芽糖和葡萄糖，相對而言，復合型麥芽糖要求維持高濃度，而葡萄糖控制在較低水平。

?

對于工業生產，成本是優先考慮的，麥芽糖是阿卡波糖發酵培養基組成中最多的一種營養成份，直接購買飴糖、高麥芽糖漿，成本比較高。同時，我們也做過考查，購買的飴糖、高麥芽糖漿，直接用于游動放線菌的發酵培養，產物阿卡波糖的濃度并不高，尤其是純麥芽糖的效果更差。阿卡波糖發酵需要復合型的麥芽糖，以麥芽二糖、麥芽三糖為主，輔以少量麥芽四糖和葡萄糖，復合麥芽糖含量越高，發酵水平相對越高，發酵液中的雜質，尤其是關鍵雜質A的含量也易于控制在較低水平（雜質A目前沒有好的提取方法去除，主要通過發酵控制）。復合麥芽糖需采用淀粉液化糖化制備，液化糖化工藝不同，得到的復合麥芽糖含量差異非常大，直接關系到阿卡波糖的發酵水平和雜質含量。本發明將淀粉經過多種酶液化、糖化，得到高含量復合麥芽糖，不需其它處理，滅菌后直接用于阿卡波糖發酵生產，是最有效、最經濟的生產方式。

發明內容

本發明的目的是針對上述現狀，提供一種經濟有效且產物純度較高的制備阿卡波糖的方法。

本發明采取的技術方案：

一種制備阿卡波糖的方法，其具體步驟為：

（1）淀粉液化：將淀粉加水攪拌溶解，配制成20-40%（w/v）的乳液，調pH到5.5-6.2，加入淀粉質量0.05-0.2%的耐高溫a-淀粉酶和0.02-0.08%無水氯化鈣，加熱到105-110℃，維持5-10分鐘，DE值達到10-18時，降溫至60℃得液化液；

（2）糖化：將步驟（1）獲得的液化液，加入所述淀粉質量0.05-0.2%的普魯蘭酶、0.05-0.2%的真菌酶、0.25-0.45%的β-淀粉酶，55-60℃維持4－8小時，得糖化液；

（3）滅菌后發酵：步驟（2）獲得的淀粉糖化液，直接加入其他營養物質制成阿卡波糖發酵培養基，滅菌后接入阿卡波糖生產菌種游動放線菌進行發酵，發酵過程中控制發酵培養液中總糖含量為6.0-12.0%（w/w），葡萄糖含量不超過2.8%（w/w），發酵培養5-6天，發酵液經提取制得阿卡波糖。

所述淀粉的含糖量為70-85%（w/w）。

本發明采用上述技術方案取得的有益效果是：

采用本發明的方法通過多種酶對淀粉（含糖量在70-85%）進行液化、糖化，淀粉轉化為復合麥芽糖的轉化率可達85-95%，用于阿卡波糖發酵生產，發酵水平高；關鍵雜質A含量低，減少了下游的提取純化壓力；淀粉代替其它糖源，生產成本更低。

本發明公開的制備阿卡波糖的方法，是一種適合阿卡波糖發酵的高產量、低雜質、低成本的生產技術。

具體實施方式

????下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。

部分試驗在麗珠集團新北江制藥股份有限公司完成。

實施例1