[發明專利]一種熒光分析方法和裝置

有效

• 申請號: 201210051830.8
• 申請日: 2012-03-01
• 公開（公告）號: CN103293303A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 龐磊
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N21/64
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君;雷芳

技術領域

本發明屬于體外檢測技術領域，具體地涉及一種基于測量熒光強度的分析方法和裝置。

背景技術

在免疫檢測領域中，常常需要對各類抗原或抗體進行定性或定量檢測。現有技術中，以“競爭抑制和雙抗夾心”為基礎衍生出多種免疫反應分析方法，如：放射免疫法、酶聯免疫法、化學發光法、時間分辨熒光法和熒光免疫法等，可用于確定病原微生物，對人體的特異性蛋白定量檢測，從而對疾病進行輔助診斷或監測等等，用途非常廣泛。這類免疫反應分析方法，通常將捕獲抗體固定于固相載體，然后與抗原(目標蛋白)反應，洗滌后再與標記抗體反應，洗滌，最后檢測放射性強度、溶液吸光度或光信號等，從而報告檢測樣本中目標蛋白的濃度。上述方法的自動化免去了人工洗滌的煩瑣，但正因為自動化，使得儀器體積龐大價格昂貴，一般只在大型實驗室使用。

1990年，Beggs等綜合膠體金和免疫分析技術，建立了膠體金免疫層析法(GICA)，用于檢測人尿和血清中的HCG(BEGGS?M，NOVOTNY?M，SAMPEDRO?S.A?selfperforming?chromatographic?immunoassay?for?the?qualitative?determination?of?human?chorionicgonadotrophin(HCG)in?urine?and?serum[J].Clin?Chem，1990，36：1084-1085)。此后20年，人們在GICA的基礎上，開發出了用于病原體(CN?03115143.4)、激素(CN?200610014168.3)、心臟標志物(CN?200410011165.5)、腫瘤標志物(CN?200510104796.6)、自身免疫病標志物(CN?200410027291.X)等的檢測試劑；同時也應用到食品、環境(CN?03116692.X)和獸醫(CN?02139704.X)領域。由于該方法只需肉眼觀察即可，非專業人士也可操作，使急診、基層醫院、病人床邊和現場等遠離大型實驗室的地方開展相關檢測成為可能，所以應用范圍相當廣泛。

雖然這種免疫分析技術已經超過20年的發展，但其基本的工作原理并未改變，這決定了到目前為止，它只用于定性或半定量檢測(根據檢測線灰度深淺定量)，且靈敏度也不如前述的定量免疫分析方法，其進一步的應用遇到了瓶頸。

因此，本領域急需對現有的膠體金層析方法進行變革，在賦予其高靈敏度和定量準確的新優勢的同時，保持其快捷、簡便、成本低廉等特點，從而進一步擴展其應用領域。

發明內容

本發明提供了一種測試片，用于定量檢測樣品中的待測物。

本發明提供了一種定量檢測待測物的檢測方法，所述方法靈敏度高，定量準確。

本發明還提供了一種定量檢測待測物的檢測裝置。

本發明第一方面提供了一種測試片，該測試片包括：

(i)可加入樣品的加樣區；

(ii)位于加樣區近端的結合區，所述結合區包含：

一種或多種可流動的結合劑，所述結合劑中至少一種被吸光物質標記，所述結合劑能與待測物或其等同物結合形成含吸光物質的復合物；

(iii)位于結合區近端和加樣區遠端的測試區，所述測試區包含固定化的捕獲劑，所述捕獲劑用于捕獲從結合區移動至測試區的被吸光物質標記的結合劑或含吸光物質的復合物，所述測試區具有熒光；和

(iv)位于測試區近端和結合區遠端的樣品吸收區，其中吸收區具有吸收能力，從而使得加至加樣區的樣品從加樣區擴散至末端樣品吸收區；

其中，當所述捕獲劑捕獲所述被吸光物質標記的結合劑或所述含吸光物質的復合物時，所述吸光物質影響所述測試區的熒光強度。

在另一優選例中，所述測試區的熒光為所述測試片的自有熒光。

在另一優選例中，所述的吸光物質影響所述測試區的熒光強度是導致測試區的熒光強度下降。

在另一優選例中，所述待測物為抗原或抗體。

在另一優選例中，所述結合劑特異性結合待測物或其等同物；較佳地，所述結合劑為抗原、抗體或寡核苷酸。

在另一優選例中，所述結合區可以包含兩種結合劑，其中，一種被吸光物質標記的結合劑，另一種被生物素標記的結合劑，所述兩種結合劑同時與待測物結合，從而形成一種被生物素標記的含吸光物質的復合物。

在另一優選例中，所述含吸光物質的復合物可以含有待測物，也可以含有待測物等同物。

在另一優選例中，所述捕獲劑特異性結合被吸光物質標記的結合劑或含吸光物質的復合物。